顯微鏡實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)知識點(diǎn)整理

　　一、實(shí)驗(yàn)方法

　　1.顯微觀察法：如“觀察細(xì)胞有絲分裂”、“觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)”、“用顯微鏡觀察多種多樣的細(xì)胞”等。

　　2.觀色法：如“生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的鑒定”、“觀察動(dòng)物毛色和植物花色的遺傳”、“DNA和RNA的分布”等。

　　3.同位素標(biāo)記法（元素示蹤法）：如“噬菌體浸染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)”、“恩格爾曼實(shí)驗(yàn)”等。

　　4.補(bǔ)充法：如用飼喂法研究甲狀腺激素，用注射法研究動(dòng)物胰島素和生長激素，用移植法研究性激素等。

　　二、實(shí)驗(yàn)技術(shù)

　　1.光學(xué)顯微鏡的使用：包括顯微鏡的取送、放置、旋轉(zhuǎn)、對光（反光鏡及光圈的使用）、低倍觀察、高倍觀察、鏡頭的擦拭；顯微鏡的放大倍數(shù)（是物體的長和寬，不是面積，也不是體積）、焦距問題、物鏡離裝片的遠(yuǎn)近、準(zhǔn)焦螺旋的使用、顯微鏡使用時(shí)物象移動(dòng)方向、顯微鏡使用時(shí)異物的判斷（通常通過移動(dòng)玻片、轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器或旋轉(zhuǎn)目鏡來判斷）。

　　2.臨時(shí)裝片、切片和涂片的制作：適用于顯微鏡觀察，凡需在顯微鏡下觀察的生物材料，必須先制成臨時(shí)裝片、切片和涂片，如“觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原”中要制作洋蔥表皮細(xì)胞的臨時(shí)裝片，在“生物組織中脂肪的鑒定”中要制作花生種子的切片，在“觀察動(dòng)物如人體血液中的細(xì)胞”中要制作血液的涂片等等。

　　3.研磨，過濾：適用于從生物組織中提取物質(zhì)如酶、色素等，要求學(xué)生熟練掌握研磨、過濾的方法，如研磨時(shí)要先將生物材料切碎，然后加入摩擦劑（常用二氧化硅）、提取液和其它必要物質(zhì)，充分研磨之后，往往要進(jìn)行過濾，以除去渣滓，所用過濾器具則根據(jù)需要或根據(jù)試題中提供的器材加以選用，如可用濾紙、紗布、脫脂棉、尼龍布等。

　　4.解離技術(shù)：適用于破壞細(xì)胞壁，分散植物細(xì)胞，制作臨時(shí)裝片。

　　5.恒溫技術(shù)：適用于有酶參加的生化反應(yīng)，一般用水浴或恒溫箱，根據(jù)題目要求選用。

　　6.層析技術(shù)：適用于溶液中物質(zhì)的分離。主要步驟包括制備濾紙條、劃濾液細(xì)線、層析分離等。

　　7.植物葉片中淀粉的鑒定：適用于光合作用的有關(guān)實(shí)驗(yàn)，主要步驟包括饑餓處理、光照、酒精脫色、加碘等。

　　8.根尖培養(yǎng)技術(shù)：有絲分裂實(shí)驗(yàn)的材料

　　9.小動(dòng)物飼養(yǎng)技術(shù)：飼養(yǎng)小白鼠等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

　　10.無土栽培技術(shù)：用于植物必需元素與非必需元素的鑒定

　　11.微電流測量技術(shù)：用于刺激神經(jīng)元細(xì)胞時(shí)，興奮的傳遞情況。刺激神經(jīng)元的某一點(diǎn)時(shí)，相對于該神經(jīng)元的刺激點(diǎn)而言，其兩側(cè)均有電位變化（用兩表則可在兩側(cè)任意位置，用一表測定則相對于受刺激點(diǎn)不等距位置有兩次偏轉(zhuǎn)）可證明在同一神經(jīng)元內(nèi)具有雙向傳遞性；刺激突觸前神經(jīng)元時(shí)，突觸后神經(jīng)元可測得電位變化，刺激突觸后神經(jīng)元時(shí)，突觸前神經(jīng)元測不到電位變化，可證明突觸傳遞具有單向傳遞性。

　　12.pH控制技術(shù)：利用緩沖液調(diào)節(jié)pH，確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境的pH相對穩(wěn)定。

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