微生物介紹

　　一．概念

　　1.衛(wèi)生微生物學(xué)：是研究微生物與其環(huán)境相互作用的規(guī)律、對(duì)人類(lèi)健康的影響以及應(yīng)對(duì)方略的科學(xué)。

　　2.生境：是指微生物能在其中生存并執(zhí)行特定功能的微小環(huán)境，又稱(chēng)之為微環(huán)境或微小生境。

　　3.龕：含義比生境更為廣泛，不但包含了生物生存的空間概念，還蘊(yùn)含著功能作用以及在不同溫度濕度等環(huán)境變化中的位置，也稱(chēng)為生態(tài)位。

　　4.適應(yīng)性：生物能適應(yīng)在一定時(shí)間內(nèi)的環(huán)境波動(dòng)或巨變以保證其本身生活和生存的能力。

　　5.變異性：指同種生物世代之間或同代生物不同個(gè)體之間在形態(tài)特征、生理特征等方面所表現(xiàn)的差異。

　　6.演替：在特定的生態(tài)系統(tǒng)中，不同生物群落相互更替的過(guò)程稱(chēng)演替。

　　7.菌群失調(diào);指在原生態(tài)環(huán)境內(nèi)正常微生物群發(fā)生種類(lèi)、總菌數(shù)和各種群落成員的活菌數(shù)的異常變化。

　　8.生物修復(fù)：是微生物催化降解有機(jī)污染物、轉(zhuǎn)化其他污染物，從而消除污染的一個(gè)受控或自發(fā)進(jìn)行的過(guò)程。

　　9.指示微生物：是在常規(guī)衛(wèi)生監(jiān)測(cè)中，用以指示樣品衛(wèi)生狀況及安全性的（非致病）微生物（或細(xì)菌）。

　　10.菌落總數(shù)：是指被檢樣品的單位重量（g）、容積、表面積或體積內(nèi)所含有的能在某種培養(yǎng)基上經(jīng)一定條件、一定時(shí)間培養(yǎng)后長(zhǎng)出的菌落數(shù)量。

　　11.消毒：是指殺滅或清除傳播媒介上病原微生物，使其達(dá)到無(wú)害化的處理。

　　12.滅菌保證水平（SAL）：?jiǎn)挝划a(chǎn)品上滅菌處理后存活微生物的概率，通常表示為10。

　　13.滅菌：是指殺滅或清除傳播媒介上一切微生物的處理。

　　14.無(wú)菌：指不存在任何微生物的狀況。

　　15.無(wú)菌操作：指在無(wú)菌狀態(tài)下的操作。

　　16.消毒劑抗性：是指與其他細(xì)菌相比，某種細(xì)菌能在更高消毒劑濃度下存活或生長(zhǎng)，說(shuō)明其具有更高的消毒劑抗性。

　　17.固有抗性：指微生物對(duì)某些消毒劑天生不敏感，一般有微生物本身的特殊結(jié)構(gòu)或性能所致

　　18.獲得性抗性：本來(lái)敏感的微生物在長(zhǎng)期與消毒劑相互作用的過(guò)程中，通過(guò)某種途徑獲得（可自發(fā)獲得或從外界獲得）了對(duì)該消毒劑的抗性基因。

　　19.生物安全：狹義上指實(shí)驗(yàn)室生物安全。廣義的生物安全是指避免由于對(duì)具有感染力的有機(jī)體或遺傳改良有機(jī)體的研究或商品化生產(chǎn)而對(duì)人類(lèi)的健康和安全以及對(duì)環(huán)境的保護(hù)帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)，尤其是外來(lái)物種的入侵及轉(zhuǎn)基因物種的產(chǎn)生、轉(zhuǎn)移及應(yīng)用等。

　　20.生物因子：是指實(shí)驗(yàn)室中操作的一切微生物和生物活性物質(zhì)。

　　21.生物安全柜（BSC）：是處理具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，用來(lái)保護(hù)操作者本人、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)材料，使其避免操作過(guò)程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物的箱型空氣凈化負(fù)壓裝置。

　　22.生物危害:是指由生物因子對(duì)環(huán)境及生物體的健康所造成的危害。

　　23.生物戰(zhàn)劑：是指能在人員或者動(dòng)植物機(jī)體內(nèi)繁殖或引起大規(guī)模疾病的微生物制劑。

　　24.微生物氣溶膠：以固體或液體微小顆粒分散于空氣中的分散體系。

　　25.腐�。褐甘称返牡鞍踪|(zhì)成分在厭氧條件下被微生物分解，產(chǎn)生以惡臭為主的變化。

　　26.酸�。褐甘称分械闹�肪成分被微生物分解成脂肪酸和甘油的變化。-n

　　27.發(fā)酵：指食品中的碳水化合物成分被微生物分解成酸、醇、和氣體的變化。

　　28.食源性疾�。菏侵竿ㄟ^(guò)攝食進(jìn)入人體的各種致病因子所引起的，通常具有感染性質(zhì)或中毒性質(zhì)的一類(lèi)疾病。

　　29.食物中毒：是指攝入了含有生物性、化學(xué)性有毒有害物質(zhì)的食品或者把有毒物質(zhì)當(dāng)做食品攝入后出現(xiàn)的非傳染性的急性、亞急性疾病。

　　30.細(xì)菌性食物中毒:是指由于食入被病原菌或其毒素污染的食物后所引起的以急性胃腸炎為主要中毒癥狀的疾病。

　　31.HACCP(危害分析關(guān)鍵控制點(diǎn))：生產(chǎn)（加工）安全食品的一種控制手段；對(duì)原料、關(guān)鍵生產(chǎn)工序、及影響產(chǎn)品安全的人為因素進(jìn)行分析，確定加工過(guò)程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，建立完善的監(jiān)控程序和監(jiān)控標(biāo)準(zhǔn)，采取規(guī)范的糾正措施。

　　32.醫(yī)院感染：是指住院患者在醫(yī)院內(nèi)獲得的感染，包括在住院期間發(fā)生的感染和在醫(yī)院內(nèi)獲得出院后發(fā)生的感染，但不包括入院前已開(kāi)始和入院前已存在的感染，醫(yī)院工作人員在醫(yī)院內(nèi)獲得的感染也屬醫(yī)院感染。

　　二．簡(jiǎn)答

　　1.衛(wèi)生微生物學(xué)定義的范疇

　　狹義上，不包括引起傳染病流行的病原微生物。

　　廣義上，包括存在于自然界的所有微生物（致病，非致病，有害，有益）.

　　2.衛(wèi)生微生物學(xué)的應(yīng)用

　�。�1）感染性疾病的控制和治療。

　　（2）感染性疾病的預(yù)防。

　�。�3）生物病原性突發(fā)事件中的應(yīng)用。

　�。�4）在制定國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)規(guī)范服務(wù)中的應(yīng)用。

　�。�5）應(yīng)對(duì)生物危害和恐怖。

　　（6）在生產(chǎn)，生活和各種產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)中的應(yīng)用。

　�。�7）在科學(xué)發(fā)展和科學(xué)研究中的應(yīng)用。

　　3.從哪些角度進(jìn)行衛(wèi)生微生物相關(guān)案例的分析？

　　4.微生物與環(huán)境相互作用的規(guī)律

　�。�1）限制因子定律：任何生物的總產(chǎn)量或生物量決定于所存在環(huán)境中該生物生長(zhǎng)所

　　需要的數(shù)量最少或濃度最低營(yíng)養(yǎng)因子（指其含量與微生物需要量之比所占的百

　　分比最低）。

　�。�2）耐受性定律：指在一個(gè)生態(tài)環(huán)境中，微生物的生長(zhǎng)繁殖和消長(zhǎng)不但取決于營(yíng)養(yǎng)，

　　而且受各種物理化學(xué)等其他因素的影響。

　�。�3）綜合作用定律：一個(gè)生物或一群生物的生存和繁殖取決于綜合環(huán)境。

　　5.微生物種群之間相互作用的類(lèi)型

　　互生：偏利互生，互利互生，互惠互生

　　競(jìng)爭(zhēng)拮抗捕食寄生共生

　　6.菌群失調(diào)的誘發(fā)因素

　�。�1）.射線照射

　�。�2）使用抗生素

　�。�3）外科手術(shù)

　�。�4）其他：醫(yī)源性因素，使用免疫制劑、細(xì)胞毒性物質(zhì)和激素，使得機(jī)體免疫力下降。

　　7.微生物在自然界物質(zhì)循環(huán)中的作用

　　將無(wú)機(jī)物合成為有機(jī)物（光合菌，化能自養(yǎng)菌）——生產(chǎn)者

　　可以分解有機(jī)物——分解者

　　又可將其還原為無(wú)機(jī)物——消耗者

　　總之，它是自然界生態(tài)系統(tǒng)能量物質(zhì)流循環(huán)中不可分割的一部分。

　　8.微生物耐受性對(duì)其生存和分布的影響

　　微生物的耐受性決定了其生存的可能性和分布的廣泛性，對(duì)許多生態(tài)因子均耐受或者對(duì)某種生態(tài)因子耐受性較寬的微生物常常分布甚廣，這是自然選擇的結(jié)果，也是微生物群落發(fā)生演替的原因。

　　9.微生物生態(tài)學(xué)的應(yīng)用

　　（1）在病因研究中的作用

　�。�2）在認(rèn)識(shí)疾病本質(zhì)中的作用

　　（3）在防治疾病中的作用

　�。�4）在環(huán)境污染預(yù)防與控制中的作用

　　對(duì)有機(jī)物的降解對(duì)金屬的轉(zhuǎn)化對(duì)污染物的降解與轉(zhuǎn)化污染環(huán)境的生物修復(fù)微生物檢測(cè)

　　10.衛(wèi)生微生物檢測(cè)的特點(diǎn)

　　檢測(cè)對(duì)象多，檢測(cè)范圍廣，標(biāo)本的來(lái)源多，檢測(cè)的方法更敏感，檢測(cè)環(huán)境標(biāo)本中數(shù)量很低的致病衛(wèi)生物以及往往需要定量和分型檢測(cè)等。

　　11.如何提高樣品中目的微生物的檢出率

　�。�1）增加加樣量

　�。�2）濃縮待測(cè)微生物

　�。�3）對(duì)目的微生物進(jìn)行選擇性増菌

　　12.對(duì)于某些含有不溶于水的成分或者抑菌成分的樣品如何處理

　　（1）檢品為固體、非水溶性軟膏等，均質(zhì)化后再進(jìn)行稀釋

　�。�2）非水溶性軟膏，也可加入乳化劑使其分散

　　（3）含有抑菌成分（防腐劑，抗生素，消毒劑）的，采取中和法，濾膜過(guò)濾法、稀釋法和離心法等。

　　另外，還應(yīng)考慮采取適當(dāng)?shù)牟襟E，使受損傷的菌株得以復(fù)蘇。

　　13.衛(wèi)生微生物檢測(cè)的基本原則

　　（1）樣品的采集原則

　　代表性和針對(duì)性避免新污染避免采樣時(shí)對(duì)微生物的殺菌作用和引入新的抑菌物質(zhì)保護(hù)目的微生物詳細(xì)標(biāo)記樣品

　　（2）樣品的運(yùn)輸原則

　　盡快送檢保護(hù)待檢微生物根據(jù)生物安全規(guī)定妥善包裝待運(yùn)輸?shù)臉?biāo)本

　　完善的樣品交接

　　（3）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)原則

　　相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室硬件設(shè)施合格的人員和標(biāo)準(zhǔn)或公認(rèn)的方法加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制根據(jù)衛(wèi)生檢驗(yàn)的特點(diǎn)采取特定措施

　　14.樣品濃縮的方式

　�。�1）沉淀法（離心沉淀）

　　（2）過(guò)濾法（濾膜過(guò)濾）

　�。�3）吸附沉淀法(特異性、非特異性）

　�。�4）免疫磁珠法(親和作用,基于抗原抗體反應(yīng))

　　15.損傷菌的復(fù)蘇

　　修復(fù)的基本方法是：在細(xì)菌繁殖之前，將其置于無(wú)選擇壓力的環(huán)境中，改變培養(yǎng)溫度和時(shí)間。

　　例如，（1）分離加工食品中的沙門(mén)菌時(shí)，先將樣品置于BP培養(yǎng)基中進(jìn)行前增殖。

　�。�2）副溶血弧菌在海產(chǎn)品加工保存中受損，用無(wú)選擇性低鹽增菌。

　�。�3）金葡菌檢測(cè)中用的肉湯中含有高鹽，亞碲酸鉀，抑制損傷菌，可加觸酶或者過(guò)氧化酶凈化劑，以中和抑菌物質(zhì)。

　　16.增菌和分離

　�。�1）物理方法;調(diào)節(jié)培養(yǎng)的溫度，氣體和光照。

　�。�2）化學(xué)方法：在分離培養(yǎng)基中加入抑制其他微生物生長(zhǎng)和促進(jìn)目的微生物生長(zhǎng)的化學(xué)制劑，配成選擇性鑒別培養(yǎng)基，達(dá)到鑒別分離的目的。

　　例如：1mg/ml青霉素抑制革蘭陽(yáng)，促進(jìn)革蘭陰

　　多粘菌素B抑制革蘭陰

　　制霉菌素、放線酮抑制真菌

　　17.定量計(jì)數(shù)的方法

　　（1）傾注平板計(jì)數(shù)法

　�。�2）表面涂布計(jì)數(shù)法

　�。�3）MPN法

　�。�4）其他

　　18.分型鑒定的方法

　�。�1）血清學(xué)分型（玻片凝集實(shí)驗(yàn)抗血清和待檢細(xì)菌懸液混合，若相應(yīng)，可見(jiàn)凝集塊）

　�。�2）.噬菌體分型（噬菌斑）

　�。�3）細(xì)菌素分型（抑菌斑:對(duì)某細(xì)菌素敏感的細(xì)菌，具有該細(xì)菌素的受體，兩者結(jié)合后，敏感菌被殺死）

　�。�4）.耐藥譜分型

　�。�5）質(zhì)粒圖譜分型（質(zhì)粒提取--限制性?xún)?nèi)切酶酶切--瓊脂糖凝膠電泳--結(jié)果觀察）

　�。�6）毒素分型（金葡菌——腸毒素肉毒梭菌——肉毒素）

　�。�7）脈沖場(chǎng)凝膠電泳分子分型（電泳譜圖0

　　（8）其他分子生物學(xué)方法

　　19.金葡菌食物中毒的實(shí)驗(yàn)室診斷標(biāo)準(zhǔn)

　�。�1）從中毒食品中檢出腸毒素

　�。�2）從中毒食品或患者吐瀉物中經(jīng)培養(yǎng)檢出金葡菌，菌株經(jīng)腸毒素檢測(cè)證實(shí)在不同樣品中檢出同一型別腸毒素

　　（3）從不同患者吐瀉物中檢出金葡菌，其腸毒素為同一型別。

　　20.衛(wèi)生指示物的類(lèi)型和衛(wèi)生意義

　�。�1）菌落總數(shù)：包括細(xì)菌菌落總數(shù)，霉菌菌落總數(shù)，酵母菌菌落總數(shù)。用以評(píng)價(jià)被檢出樣品的一般衛(wèi)生質(zhì)量，污染程度和安全性。

　�。�2）大腸菌群，糞大腸菌群，大腸埃希菌，糞鏈球菌，產(chǎn)氣莢膜梭菌等。用以評(píng)價(jià)檢品受人畜糞便的污染狀況，間接反應(yīng)腸道病原微生物存在的可能性，對(duì)樣品的衛(wèi)生安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)。

　�。�3）其他指示菌：包括某些特定環(huán)境下不能檢出的菌類(lèi)（特定菌，致病菌，指示性微生物）

　　（4）病毒（包括噬菌體）：間接反映腸道病毒存在的可能性。

　　21.指示微生物選擇的原則

　　數(shù)量大，易于檢出；檢驗(yàn)方法簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、方便；有一定的代表性，其數(shù)量化能反映樣品的衛(wèi)生狀況和安全性。

　　22.理想的糞便污染的指示菌應(yīng)具備的條件

　�。�1）是人及溫血?jiǎng)游锬c道正常菌群的組成部分，而且數(shù)量大

　　（2）排除體外后，在外界環(huán)境中存活時(shí)間與腸道致病菌大致相似或稍長(zhǎng)

　�。�3）排除體外后，在外界環(huán)境中不繁殖

　�。�4）在被人或動(dòng)物的糞便污染的樣品中易檢出，而未被糞便污染的樣品中無(wú)此種菌存在

　　（5）用作飲用水的指示菌，對(duì)常用飲用水消毒劑的抵抗力應(yīng)不低于或略強(qiáng)于腸道致病菌

　�。�6）檢驗(yàn)方法簡(jiǎn)單，易于定量計(jì)數(shù)

　　23.不直接檢測(cè)致病微生物，而通過(guò)檢測(cè)指示微生物反應(yīng)樣品衛(wèi)生安全性的原因

　　（1）致病微生物種類(lèi)繁多，檢測(cè)方法多樣，不可能分別檢測(cè)各種微生物

　�。�2）分離、鑒定致病微生物需時(shí)長(zhǎng)，不滿足實(shí)際工作需要

　�。�3）分離鑒定致病微生物費(fèi)用高，對(duì)技術(shù)人員要求也高

　�。�4）致病微生物數(shù)量少，而可能由于檢測(cè)方法靈敏度不高，或者受檢測(cè)量的限制而導(dǎo)致假陰性結(jié)果

　　24.我國(guó)規(guī)定的不得檢出的致病菌

　�。�1）沙門(mén)菌和志賀菌：腸道致病菌糞口傳播

　�。�2）金葡菌（皮膚鼻咽腸道）

　�。�3）銅綠假單胞菌(皮膚，上呼吸道腸道）

　�。�4）破傷風(fēng)梭菌（破傷風(fēng)痙攣毒素）

　　25.理想的病毒指示物的條件

　　（1）檢驗(yàn)方法簡(jiǎn)單

　�。�2）操作安全

　�。�3）抵抗力與腸道病毒相當(dāng)或稍強(qiáng)

　　（4）在被人糞腸道病毒污染的環(huán)境中一定存在，其存在數(shù)量應(yīng)≥腸道病毒的數(shù)目

　　26.腸道病毒的指示微生物

　　大腸埃希菌噬菌體f2脊髓灰質(zhì)炎病毒減毒疫苗株Ⅰ

　　27.滅菌的物質(zhì)應(yīng)：無(wú)菌，無(wú)毒，無(wú)熱原質(zhì)，無(wú)變應(yīng)原。

　　28.消毒與滅菌的區(qū)別與聯(lián)系：消毒是指殺滅或清除傳播媒介上的病原微生物，使之減少到不引發(fā)疾病即可，其要求的程度因微生物的種類(lèi)與防病的需要而異；滅菌需要?dú)�滅或清除全部的微生物，其概念是絕對(duì)性的，不隨條件的變化而變化。消毒處理不一定能達(dá)到滅菌的處理，但滅菌處理一定可達(dá)到消毒的目的。

　　29.常用的物理化學(xué)消毒滅菌法

　�。�1）物理：熱力、紫外線、電離輻射、濾過(guò)除菌、微波消毒、脈沖強(qiáng)光

　　（2）化學(xué)：含氯消毒劑、過(guò)氧化物類(lèi)消毒劑、碘消毒劑、醇類(lèi)消毒劑、醛類(lèi)消毒劑、季銨鹽類(lèi)消毒劑、胍類(lèi)，酚類(lèi)，氣體消毒劑，其他

　�。�3）生物：利用活體生物或生物材料

　　30.消毒滅菌效果的影響因素

　�。�1）處理的劑量（強(qiáng)度，時(shí)間）（2）微生物的種類(lèi)和數(shù)量

　　（3）溫度（4）濕度（5）酸堿度（6）化學(xué)拮抗物質(zhì)（7）穿透力