微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告
在經(jīng)濟(jì)飛速發(fā)展的今天,需要使用報(bào)告的情況越來越多,多數(shù)報(bào)告都是在事情做完或發(fā)生后撰寫的。寫起報(bào)告來就毫無頭緒?以下是小編精心整理的微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告,希望能夠幫助到大家。
微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告1
為加強(qiáng)醫(yī)院病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作,確保醫(yī)院平安目標(biāo)的實(shí)現(xiàn),我院檢驗(yàn)科根據(jù)xxxx省《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》的相關(guān)內(nèi)容,對醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室安全管理工作進(jìn)行了自查,對涉及病原微生物菌(毒)種及樣本的人員進(jìn)行了培訓(xùn),提高他們生物安全的意識,掌握必要的生物安全知識。
一、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作、各項(xiàng)規(guī)章制度的運(yùn)行情況
醫(yī)院檢驗(yàn)科根據(jù)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行學(xué)習(xí),并定期對有關(guān)生物安全各項(xiàng)規(guī)章制度的運(yùn)行情況進(jìn)行檢查,對存在的問題及時(shí)進(jìn)行整改。實(shí)驗(yàn)室所從事的'實(shí)驗(yàn)活動(dòng)均嚴(yán)格遵守有關(guān)的國家標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程,并指定專人監(jiān)督檢查實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范和操作規(guī)程的落實(shí)情況。同時(shí),對檢查情況進(jìn)行詳細(xì)記錄,定期召開會(huì)議討論工作中發(fā)現(xiàn)的問題,及時(shí)糾正。
二、病原微生物菌(毒)種的管理及運(yùn)輸
因各方面條件限制我院現(xiàn)不能開展病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物的檢查,根據(jù)通知要求積極組織相關(guān)人員主要學(xué)習(xí)了:病原微生物實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種的管理嚴(yán)格登記制度,收到菌(毒)種后立即進(jìn)行編號登記,詳細(xì)記錄菌(毒)種的名稱、來源、特性、用途、批號、傳代日期、數(shù)量。在菌(毒)種的管理,安全保衛(wèi)制度,安全保衛(wèi)措施,保管過程中,傳代、分發(fā)及使用,均應(yīng)及時(shí)登記,定期核對庫存數(shù)量。菌(毒)種在進(jìn)行銷毀時(shí),滅菌指示標(biāo)志,滅菌效果,同時(shí)做好銷毀登記等內(nèi)容。
三、實(shí)驗(yàn)室生物安全突發(fā)事件的處理工作
在此次自檢中,我院實(shí)驗(yàn)室對以前制訂的處置意外事件的應(yīng)急指揮和處置體系,進(jìn)一步進(jìn)行了修訂,使之能滿足實(shí)際工作的需要。
針對當(dāng)發(fā)生自然災(zāi)害(如地震、水災(zāi)等)或設(shè)施出現(xiàn)故障時(shí),我們制定了可能遇到的緊急情況及其處理原則。
同時(shí)規(guī)范了菌(毒)種外溢在臺面、地面和其他表面的的處理原則、皮膚刺傷(破損)的處理原則、離心管發(fā)生破裂的處理原則并建立了意外事故報(bào)告制度。
在實(shí)驗(yàn)室的顯著位置張貼了實(shí)驗(yàn)負(fù)責(zé)人、實(shí)驗(yàn)室工作人員、消防、醫(yī)院、公安、工程技術(shù)人員、水、電氣維修部門電話。
四、提高意識,加強(qiáng)學(xué)習(xí)
組織檢驗(yàn)人員對《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》進(jìn)行全面系統(tǒng)的學(xué)習(xí),同時(shí)加強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)入制度的管理,標(biāo)明實(shí)驗(yàn)室類型、負(fù)責(zé)人及其聯(lián)絡(luò)方式。加強(qiáng)了個(gè)人安全防護(hù),并要求檢驗(yàn)人員嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)的操作規(guī)程進(jìn)行檢驗(yàn)。
通過這次對微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作自查,提高了全體檢驗(yàn)人員對微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作重要性的認(rèn)識,加強(qiáng)管理,采取有效措施,確保實(shí)驗(yàn)室工作安全。
微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告2
第十次實(shí)驗(yàn)分離產(chǎn)淀粉酶微生物
學(xué)院:生命科學(xué)學(xué)院
專業(yè):生物科學(xué)類
年級:20xx級
姓名:
學(xué)號:1007040085
20xx年XX月XX日
實(shí)驗(yàn)十分離產(chǎn)淀粉酶的微生物
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1、熟悉常用微生物培養(yǎng)基(牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基)的配制方法。
2、學(xué)習(xí)各種無菌操作技術(shù),并用此技術(shù)進(jìn)行為微生物稀釋分離、劃線分離接種。
3、用平板劃線法和稀釋涂布平板發(fā)分離微生物。
4、認(rèn)識為微生物存在的普遍性,體會(huì)無菌操作的重要性。
5、掌握分離產(chǎn)淀粉酶微生物的試驗(yàn)方法和步驟,了解產(chǎn)淀粉酶的微生物種類及形態(tài)。
二、實(shí)驗(yàn)原理
土壤是微生物生活的大本營,是尋找和發(fā)現(xiàn)有重要應(yīng)用潛力的微生物的主要菌源。不同土樣中各類微生物數(shù)量不同,一般土壤中細(xì)菌數(shù)量最多,其次為放線菌和霉菌。一般在較干燥,偏堿性、有機(jī)質(zhì)豐富的土壤中放線苗數(shù)量較多;酵母菌在一般土壤中的數(shù)量較少,而在水果表皮、葡萄園、果園土中數(shù)量多些。本次實(shí)驗(yàn)從土壤中分離產(chǎn)淀粉酶的微生物,應(yīng)該取那些富含產(chǎn)淀粉酶的微生物的土樣。從復(fù)雜的微生物群體中獲得只含有一種或某一類型微生物的過程稱為微生物的分離與純化。常用的方法有
1、簡單單細(xì)胞挑取法
2、平板分離法和稀釋涂布平板法
此次實(shí)驗(yàn)采取的是平板分離法和稀釋涂布平板法結(jié)合,該方法操作簡單,普遍用于微生物的分離與純化。其原理包括:
1)稀釋后的細(xì)胞懸液圖不在平板上可以分離得單個(gè)菌株
2)在適合于待分離微生物的生長條件(如營養(yǎng)、酸堿度、溫度與氧等)下培養(yǎng)微生物,或加入某種抑制劑造成只利于待分離微生物的生長,而抑制其他微生物生長的環(huán)境,從而淘汰一些不需要的微生物。
3)微生物在固體培養(yǎng)基上生長形成的單個(gè)菌落可以是由一個(gè)細(xì)胞繁殖而成的集合體。因此可通過挑取單菌落而獲得純培養(yǎng)。獲得單菌落的方法可通過稀釋涂布平板或平板劃線等方法完成。
以淀粉作為惟一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)未分離細(xì)菌,能產(chǎn)淀粉酶的細(xì)菌能生長,且菌落周圍出現(xiàn)透明圈(淀粉不透明,被消化后變透明),則產(chǎn)淀粉酶微生物被分離出來。本實(shí)驗(yàn)采用透明圈檢驗(yàn)法檢測培養(yǎng)物中是否有產(chǎn)淀粉酶微生物的生長。
三、實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
1、器材:
培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、普通光學(xué)顯微鏡、量筒、滴管、吸水紙、燒杯、三角瓶、酒精燈、玻璃棒、接種環(huán)、鑷子、恒溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌鍋、、天平、濾紙、pH試紙等。
2、試劑:
配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的原料(牛肉膏、NaCl、瓊脂、蛋白胨)、淀粉、盧戈氏碘液、蒸餾水、250ml三角瓶中裝90ml無菌水加20粒玻璃珠,作稀釋用等。
3、土樣:
取自貴州大學(xué)農(nóng)生樓后土壤10g,地下10cm左右。
四、實(shí)驗(yàn)步驟:
1、配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基:
1)配制牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基400ml(用于11個(gè)平皿和7支試管斜面)牛肉膏0.5%…………………………………2g
蛋白胨1%……………………………………4g
NaCl0.5%…………………………………..2g
瓊脂2%……………………………………..8g
淀粉0.5%........................................2g
pH……………………………………7.0~7.2
。2)無菌水的制備
分別取9ml蒸餾水加入5支試管中,加塞后用報(bào)紙包扎捆綁,放入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌備用。取90ml蒸餾水加入250ml三角瓶中,同樣的操作,滅菌備用。
。3)器皿的準(zhǔn)備
將刻度吸管用報(bào)紙包扎,培養(yǎng)皿裝入專用滅菌杯分別放入高溫滅菌箱滅菌備用。
2)倒11個(gè)平板和7支試管斜面,包扎,0.1Mp、121℃、滅菌30min.
2、制備土壤稀釋液:
稱取土樣10g,放入盛有250ml無菌水的帶有玻璃珠的三角瓶中,振蕩搖勻10min使土和水充分混合,然后用移液槍從三角瓶中吸取1ml(此操作要求無菌操作),加入另一盛有9ml無菌水的.試管中,混合均勻,以此類推分別制成制成0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001不同稀釋度的土壤溶液。
3、涂布培養(yǎng):
0.00001、0.000001濃度的土壤稀釋液作為涂布平板培養(yǎng)的對象,將其分別涂布在3個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中,共6個(gè)培養(yǎng)基,標(biāo)號,37°C溫箱培養(yǎng)48h。
4、選取目的菌株:
兩天后對土壤溶液的微生物培養(yǎng)基進(jìn)行觀察,并取兩個(gè)菌落形態(tài)完全一致的分散的單個(gè)菌落,對其中一個(gè)噴灑盧戈氏碘液,觀察其菌落周圍是否出現(xiàn)透明圈,如果出現(xiàn)透明圈說明此菌株產(chǎn)淀粉酶,是目的菌株,記錄細(xì)菌明顯的性狀。
微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告3
一、實(shí)驗(yàn)名稱
用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2、觀察高等植物的葉綠體在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布
三、實(shí)驗(yàn)原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運(yùn)動(dòng),改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強(qiáng)光灼傷。在強(qiáng)光下,葉綠體以其橢球體的側(cè)面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內(nèi)葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。活細(xì)胞中的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),觀察細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng),可以用細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運(yùn)動(dòng)做為標(biāo)志。
四、材料用具
蘚類的`葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養(yǎng)皿,鉛筆
五、實(shí)驗(yàn)過程(見書p30)
1、制作蘚類葉片的臨時(shí)裝片
2、用顯微鏡觀察葉綠體
3、制作黑藻葉片臨時(shí)裝片
4、用顯微鏡觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
六、討論
1、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動(dòng),為什么?
2、葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?
3、植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),這對于活細(xì)胞完成生命活動(dòng)有什么意義?
4、用鉛筆畫一個(gè)葉片細(xì)胞,標(biāo)出葉綠體的大致流動(dòng)方向。
微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告4
實(shí)驗(yàn)名稱:
觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、學(xué)習(xí)制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本。
2、學(xué)會(huì)使用顯微鏡觀察洋蔥表皮,用圖畫記錄觀察到的洋蔥表皮細(xì)胞。
3、對比用肉眼、放大鏡、顯微鏡看到的洋蔥表皮各有什么不同。
實(shí)驗(yàn)重點(diǎn):
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
實(shí)驗(yàn)難點(diǎn):
正確使用顯微鏡。
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:
分組實(shí)驗(yàn)器材:顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。 實(shí)驗(yàn)過程:
一、導(dǎo)入課題
出示洋蔥。問:如果從它的內(nèi)表皮上揭下一塊,用顯微鏡來觀察能看到些什么呢?(板書課題)
二、制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本
1、師講解并演示制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本的方法與步驟。
。1)在一個(gè)干凈的玻璃載片中間滴一滴清水;
。2)用小刀在洋蔥鱗葉片內(nèi)壁劃一個(gè)“井”字,用鑷子取下“井”中洋蔥內(nèi)表皮放到載玻片的水滴中央,注意標(biāo)本要平展開,不能折疊;
。3)用蓋玻片傾斜著蓋到標(biāo)本上面,放蓋玻片時(shí),先放一端,再慢慢放下另一端,注意不要有氣泡。如水不足,可沿蓋玻片邊緣滴加;若水分過多,可用吸水紙吸掉;
。4)從蓋玻片的`一邊滴一滴稀釋的碘酒,并把玻片微微傾斜,再在蓋玻片的另一邊用吸水紙吸掉多余的水;
。5)洋蔥表皮玻片標(biāo)本做成可進(jìn)行觀察。
2、學(xué)生以組為單位自制玻片標(biāo)本(最好制三份裝片,便于下面的對比觀察),教師巡視指導(dǎo)(教育學(xué)生注意安全)。
三、觀察洋蔥表皮細(xì)胞
1、先用肉眼觀察洋蔥表皮將看到的內(nèi)容畫在科學(xué)記錄本上。
2、再用放大鏡觀察洋蔥表皮將看到的內(nèi)容畫到科學(xué)記錄本上。
3、學(xué)生交流用肉眼和放大鏡分別觀察到什么?它們有何不同?
4、利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
(1)、出示顯微鏡,引導(dǎo)學(xué)生認(rèn)識顯微鏡,簡介各部分的名稱、功能及使用方法,學(xué)生每5人一組操作熟悉顯微鏡。
。2)、各組利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。(師操作演示:安放――對光――上片――調(diào)焦――觀察。生一步步跟著操作。)
。3)、學(xué)生觀察、記錄、描畫洋蔥表皮細(xì)胞。教師巡視指導(dǎo),各組的實(shí)驗(yàn)組長監(jiān)督組員操作是否規(guī)范,要求每個(gè)人都要操作、都要觀察,并將觀察結(jié)果進(jìn)行交流。組長將大家在顯微鏡下的發(fā)現(xiàn)畫到科學(xué)記錄本上。
5、全班交流在顯微鏡下的發(fā)現(xiàn)。
。1)各組推薦發(fā)言代表談自己的發(fā)現(xiàn)。
。2)各組將所畫的觀察結(jié)果向全班展示。
。3)交流討論評價(jià)。
6、師小結(jié):我們發(fā)現(xiàn)放大鏡比肉眼、顯微鏡比放大鏡看到的細(xì)節(jié)更多,更清楚。我們發(fā)現(xiàn)洋蔥表皮是由一個(gè)個(gè)比較規(guī)則的多邊形組成的,而且大多呈長方形,外為細(xì)胞壁,內(nèi)為無色細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。洋蔥表皮上的一個(gè)個(gè)小房間似的結(jié)構(gòu),就是洋蔥的細(xì)胞。(師一邊描述一邊畫洋蔥細(xì)胞簡圖)
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)束。
回收實(shí)驗(yàn)器材,整理實(shí)驗(yàn)桌。
微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告5
一、實(shí)驗(yàn)題目:
微生物的革蘭氏染色
二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、學(xué)習(xí)并初步掌握革蘭氏染色法;
2、了解革蘭氏染色的原理;
3、鞏固顯微鏡的使用。
三、實(shí)驗(yàn)原理:
革蘭氏染色是1884年丹麥病理學(xué)家christain gram氏創(chuàng)立的,是細(xì)菌學(xué)中最重要的.鑒別染色法。
染色步驟分為四個(gè)部分:
1、初染:加入堿性染料結(jié)晶紫固定細(xì)菌圖片;
2、媒染:加入碘液,碘與結(jié)晶紫形成一種不溶于水的復(fù)合物;
3、脫色:利用有機(jī)溶劑乙醇或丙酮進(jìn)行脫色;
g-和g+細(xì)胞壁的比較:
1、陽性(g+)菌細(xì)胞壁特點(diǎn):細(xì)胞壁厚,只有一層,主要由肽聚糖構(gòu)成,肽聚糖含量高,結(jié)構(gòu)緊密,脂類含量低。當(dāng)乙醇脫色時(shí),細(xì)胞壁肽聚糖層孔徑變小,通透性降低,結(jié)晶紫和碘的復(fù)合物被保留在細(xì)胞壁內(nèi),復(fù)染后仍顯紫色(如芽孢桿菌)。
2、陰性(g-)菌細(xì)胞壁特點(diǎn):細(xì)胞壁薄,由兩層構(gòu)成,內(nèi)壁層和外壁層,細(xì)胞壁中脂類中脂類物質(zhì)含量較高,肽聚糖含量較低,網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)交聯(lián)程度低,乙醇脫色時(shí)溶解了脂類物質(zhì),通透性增強(qiáng),結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物易被乙醇抽提出來,因此,革蘭氏陰性菌細(xì)胞被脫色,當(dāng)復(fù)染時(shí),脫掉紫色的細(xì)胞的細(xì)胞壁又著上紅色(例如大腸桿菌)。
四、實(shí)驗(yàn)器材:
1、菌種:大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌。
2、溶液和試劑:革蘭氏染液、草酸銨結(jié)晶紫染液、碘液、95%乙醇、番紅復(fù)染液、水。
3、儀器及其他用品:酒精燈、載玻片、顯微鏡、接種環(huán)、試管架、濾紙、滴管。
五、實(shí)驗(yàn)步驟:
1、取一個(gè)載玻片,將其洗凈并沿一個(gè)方向擦拭干凈,直至液體不再其上收縮為止;將接種環(huán)整平,用灼燒過的接種環(huán)在混勻的菌種中取菌,按常規(guī)方法圖片,應(yīng)涂大,不宜過厚。
2、打開酒精燈,用火焰固定,不宜烤得太狠,否則菌種呈假陽性。
3、輕旋結(jié)晶紫染液滴管,將其旋出,滴加1滴草酸銨結(jié)晶紫染液覆蓋涂菌部位(輕晃使其完全覆蓋),染色40s。
4、染色完成后傾去染液,水洗至流出水為無色。
5、將玻片上殘留水用濾紙吸去,待其干燥。
6、在涂菌部位滴加碘液,覆蓋1min。
7、媒染完成后,傾去碘液,水洗至流出水無色。
8、將玻片上殘留水用濾紙吸去,待其干燥。
9、將載玻片放在白色筆記本上,用滴管滴加95%乙醇脫色,脫色30~40s,不宜脫色太狠,否則菌種呈假陰性。
10、脫色完成后立即用水洗去乙醇。
11、將玻片上殘留水用濾紙吸去,待其干燥。
12、滴加番紅復(fù)染液,染色4min。
13、染色完成后,水洗至流出水無色。
14、吸去殘留水并晾干。
15、用顯微鏡觀察并繪圖。
用以上步驟完成:大腸桿菌和枯草芽孢桿菌的混合圖片染色、大腸桿菌單獨(dú)菌種染色、金黃色葡萄球菌單獨(dú)菌種染色。
六、注意事項(xiàng):
1、選用活躍生長期菌種染色,老齡的革蘭氏陽性細(xì)菌會(huì)被染成紅色而造成假陰性。
2、圖片不宜過厚,以免脫色不完全造成假陽性。
3、脫色是革蘭氏染色是否成功的關(guān)鍵,脫色不夠造成假陽性,脫色過度造成假陰性。
七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論:
1、結(jié)果:
繪出高倍鏡下觀察的菌體圖像。
2、思考題:
。1)寫出常見的革蘭氏陽性菌與陰性菌,包括致病菌。
。2)革蘭氏染色的原理是什么?印象因素有哪些?
。3)如何驗(yàn)證你的染色結(jié)果是否正確?
微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告6
一、實(shí)驗(yàn)名稱:
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞
二、實(shí)驗(yàn)材料:
顯微鏡、洋蔥表皮細(xì)胞切片,及其他細(xì)胞裝片。
三、實(shí)驗(yàn)步驟:
1、右手握住鏡臂,左手托住鏡座,把顯微鏡向著光放在實(shí)驗(yàn)臺上。
2、對光:轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對準(zhǔn)通光孔。
3、調(diào)節(jié)載物臺下的反光鏡,從目鏡往下看,能看見亮的'光圈。
4、觀察:調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋,把所要觀察的洋蔥表皮切片放在載物臺上,用壓片夾夾住,標(biāo)本要正對通光孔的中央。
5、左眼向目鏡內(nèi)看,同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋等,直到看清切片上的細(xì)胞為止,最后整理器材。
四、使用注意事項(xiàng):
1、取送顯微鏡時(shí),應(yīng)右手握住鏡臂,左手托住鏡座,輕拿輕放。
2、鏡檢時(shí),坐姿端正,一般用左眼觀察物象,用右眼看著實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙畫圖。兩眼須同時(shí)睜開。
3、切忌一面從目鏡進(jìn)行觀察,一面使鏡筒下降,這樣容易使物鏡與玻片標(biāo)本碰撞而損壞。
4、在高倍鏡下調(diào)節(jié)焦距時(shí),切勿使用粗調(diào)節(jié)器,以免壓壞標(biāo)本,損壞物鏡。
5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒,移開鏡頭后再取出玻片標(biāo)本,以免取玻片時(shí)擦損鏡頭的鏡面。
五、實(shí)驗(yàn)原理:
利用教學(xué)顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
六、創(chuàng)新點(diǎn):
在實(shí)驗(yàn)過程中為學(xué)生提供多種細(xì)胞裝片,以供學(xué)生操作、觀察,增加了學(xué)生動(dòng)手實(shí)驗(yàn)的時(shí)間,使學(xué)生在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)歷調(diào)節(jié)顯微鏡的焦距的過程,從而熟練掌握教學(xué)教學(xué)顯微鏡的使用方法。
微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告7
霉菌的培養(yǎng)與形態(tài)學(xué)觀察:實(shí)驗(yàn)一真菌培養(yǎng)基的配制與滅菌
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
。1)了解培養(yǎng)基的配置原理和方法,掌握分離培養(yǎng)微生物的有關(guān)準(zhǔn)備工作。
(2)掌握高壓滅菌方法及原理
實(shí)驗(yàn)原理:
。1)培養(yǎng)基的制備原理:
培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。
從營養(yǎng)角度分析:
營養(yǎng):碳源、氮源、能源、生長素、水分和無機(jī)鹽等;?適宜的酸堿度(pH值)和一定緩沖能力;?一定的氧化還原電位;?合適的滲透壓。
瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質(zhì),是應(yīng)用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養(yǎng)基在98~100℃下融化,于45℃以下凝固,不容易被微生物污染。但多次反復(fù)融化,其凝固性降低。
。2)濕熱滅菌原理-高壓蒸汽滅菌
在密閉的蒸鍋內(nèi),其中的蒸汽不能外溢,壓力不斷上升,使水的沸點(diǎn)不斷提高,從而鍋內(nèi)溫
度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下,鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下,可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。
實(shí)驗(yàn)材料與方法
配制培養(yǎng)基所需器材
實(shí)驗(yàn)設(shè)備:高壓蒸汽滅菌器。
實(shí)驗(yàn)器材:500ml三角燒瓶、藍(lán)蓋瓶、5ml刻度吸管、培養(yǎng)基、天平、砝碼、
稱量紙、藥勺、500ml、100ml量筒、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐、平皿、剪刀等。
培養(yǎng)基等集中放講臺前高壓桶內(nèi),送到洗刷室統(tǒng)一高壓滅菌條件及注意事項(xiàng)
高壓滅菌條件:121.3℃,15min。含糖培養(yǎng)基113℃,15min。
倒平板電爐加熱滅菌好的培養(yǎng)基打開平皿包裝倒平板(10塊)注意事項(xiàng):空氣環(huán)境無菌(應(yīng)在酒精燈火焰周圍無菌區(qū))。
a.在酒精燈火焰處,傾斜打開瓶口。
b.瓶口要過火焰。
c.左手掀開平皿小口。
d.傾注滿皿底再多一點(diǎn),約10ml(7cm直徑平皿)。
e.推放一邊要輕緩,不能晃起瓊脂掛壁,易在培養(yǎng)過程中污染雜菌。
f.完全凝固再翻轉(zhuǎn)平板放塑料筐內(nèi),4℃?zhèn)溆谩?/p>
分析與討論
(1)如何證明培養(yǎng)基滅菌是否徹底?
把滅菌后的培養(yǎng)基按滅菌鍋內(nèi)的不同位置,每處抽取數(shù)管(瓶),標(biāo)上記號,置25℃~30℃培養(yǎng)一周左右進(jìn)行檢查。如果培養(yǎng)基沒有什么變化,說明滅菌效果良好;如果某一位置的培養(yǎng)基出現(xiàn)了雜菌菌落,可能是擺放的太緊,導(dǎo)致蒸汽不暢,或鍋的`結(jié)構(gòu)不合理等原因所致,應(yīng)根據(jù)上述情況進(jìn)行改進(jìn);如果大部分或全部菌種瓶都出現(xiàn)雜菌,說明滅菌溫度或滅菌時(shí)間不夠,應(yīng)提高壓力或延長滅菌時(shí)間。經(jīng)過幾次檢驗(yàn)都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。
經(jīng)過幾次檢驗(yàn)都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。
。2)為什么說消毒與滅菌是微生物學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)必不可少的基本知識?由于病原生物廣泛存在于自然界,可通過不同途徑和媒介進(jìn)入人體,引起感染或造成疾病流行。因此,殺滅或清除存在于體外傳播媒介上的病原生物,對于切斷傳播途徑、預(yù)防和控制其感染具有重要意義。自古以來,人們就利用煮沸、火燒、日曬等方法殺滅或去除微生物,達(dá)到預(yù)防疾病的目的。實(shí)際上,除了在臨床醫(yī)療實(shí)踐中需要防止微生物的污染或感染外,在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、食物保存、飲水凈化、藥品與生物制品生產(chǎn)等過程中都需要避免微生物的污染。
實(shí)驗(yàn)二霉菌的接種與培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求:掌握霉菌與酵母菌的接種與培養(yǎng)方法。
實(shí)驗(yàn)原理:
接種是微生物實(shí)驗(yàn)及科學(xué)研究中一項(xiàng)基本操作技術(shù)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?/p>
選擇合適的接種工具與接種方法,接種工具有接種環(huán)、接種針、接種鏟、接種鉤、吸管、滴管、棉簽等。常用接種方法有:斜面接種,液體接種,穿刺接種,平板接種和固體接種。接種的關(guān)鍵是無菌操作。
無菌操作的原則:在酒精燈火焰旁進(jìn)行,所有器皿均須嚴(yán)格消毒,培養(yǎng)基應(yīng)事先做無菌試驗(yàn),
接種工具使用前后須經(jīng)火焰燒灼滅菌,棉塞不能亂放,始終夾在手指中。在培養(yǎng)四大類微生物時(shí)應(yīng)注意選擇適宜的培養(yǎng)條件。多數(shù)細(xì)菌為專性需氧菌與兼性需氧菌,少數(shù)為厭氧菌。多數(shù)食品腐敗菌和工業(yè)用菌種,以及人和動(dòng)物病原菌的最適生長溫度為37℃,并且在近中性(PH6.5~7.5)條件下生長良好。多數(shù)放線菌為好氧菌,少數(shù)為厭氧菌,最適生長溫度為28~30℃,多數(shù)適宜在偏堿性環(huán)境中生長(PH7.5~8.5)。
實(shí)驗(yàn)材料與方法
。1)實(shí)驗(yàn)材料:實(shí)驗(yàn)設(shè)備:溫箱。
實(shí)驗(yàn)器材:毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假絲酵母、新生隱球酵母菌、細(xì)黃鏈霉菌、PDA平板、高鹽察氏平板、高氏合成I號平板、塑料筐、20%甘油水溶液、鑷子、接種鏟、無菌蓋玻片、無菌濾紙、無菌載玻片、石棉網(wǎng)、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐等。
。2)實(shí)驗(yàn)方法:平板接種:毛霉→PDA平板(點(diǎn)植法)
啤酒酵母→PDA平板(五區(qū)分離劃線法)青霉、曲霉→PDA平板(連續(xù)劃線法)
小室載玻片培養(yǎng)法:
1、取滅菌后小室平皿。
2、取無菌PDA瓊脂薄層平板,用鑷子夾住蓋玻片切割成0.5~1.0cm2的瓊脂塊,并將其移至培養(yǎng)小室中的載玻片上,制作過程注意無菌。
3、用接種環(huán)取少量霉菌的孢子接種于培養(yǎng)基四周,用無菌鑷子
將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上,并(轉(zhuǎn)載于:l滅菌的20%甘油(用于保持濕度),蓋上皿蓋,標(biāo)記,置28~30℃培養(yǎng)3~5d
糧食產(chǎn)品的平板接種:
1.取糧食樣品20g,放入無菌燒杯,加無菌水洗滌,
反復(fù)10次,棄去水后,將糧粒倒于平皿內(nèi)備用2.鑷子取糧食種入PDA瓊脂內(nèi),每皿可接種5-10粒。
放線菌的接種:取細(xì)黃鏈霉菌劃線法接種,在接種的劃線處,無
菌操作斜插入蓋玻片數(shù)張。
注意事項(xiàng):
1.空氣環(huán)境無菌(應(yīng)在酒精燈火焰周圍無菌區(qū))
2.在酒精燈火焰處,傾斜打開瓶口。
3.接種環(huán)使用前,直接在酒精燈上燒灼滅菌,把環(huán)和金屬絲燒紅即可。
4.接種環(huán)使用后,先在火焰周圍把環(huán)上標(biāo)本烤干,再燒灼滅菌,以免標(biāo)本汽化,爆烈四濺,污染環(huán)境。5.金屬桿快速通過火焰2-3次,殺滅表面微生物
分析與討論
1、糧食中產(chǎn)毒真菌的種類及產(chǎn)生毒素?
青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、細(xì)黃鏈霉菌(放線菌)青霉素、絲生毛霉素、黃曲霉素、根霉素、白念菌素。細(xì)黃鏈菌素
2、常用霉菌培養(yǎng)基有哪些?
馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基
豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)瓊脂培養(yǎng)基察氏培養(yǎng)基
3、霉菌的接種方法有何不同?為什么?
。1)連續(xù)劃線法(青霉、曲霉)
青霉與曲霉為局限性生長的霉菌。應(yīng)采用連續(xù)劃線接種法接種。(2)點(diǎn)植法(根霉、毛霉)
根霉與毛霉生長區(qū)域比較大,應(yīng)采用點(diǎn)植法。(3)小室載玻片培養(yǎng)法(青霉、毛霉、根霉、曲霉)
實(shí)驗(yàn)三霉菌的制片與形態(tài)觀察
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)并掌握觀察霉菌形態(tài)的基本方法;
了解四類常見霉菌的基本形態(tài)特征。了解放線菌的基本形態(tài)特征。
實(shí)驗(yàn)原理:霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細(xì)菌和放線菌粗得多(約為3-10μm),常是細(xì)
菌菌體寬度的幾倍至幾十倍,因此,用低倍顯微鏡即可觀察。霉菌菌絲較粗大,細(xì)胞易收縮變形,且孢子容易飛散,所以制標(biāo)本時(shí)常用乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液,用此染液做霉菌制片的特點(diǎn)是細(xì)胞不變形,具有殺菌、防腐作用,不易干燥,能保持較長時(shí)間,能防止孢子四處飛散,棉蘭具有一定的染色作用,染液的藍(lán)色能增大反差。
實(shí)驗(yàn)材料:
。ㄒ唬┚N:在馬鈴薯瓊脂平板上培養(yǎng)3—4天的青霉(Penicilliumsp.)、曲霉(Aspergillussp.)、毛霉(Mucorsp.)、根霉;
(二)器材及用具:鑷子、載玻片、蓋玻片、顯微鏡。
實(shí)驗(yàn)方法:
。ㄒ唬┲苯又破^察
于潔凈載玻片上,用鑷子取霉菌菌落的邊緣處取小量帶有孢子的菌絲,然后小心地蓋上蓋玻
片。置顯微鏡下先用低倍鏡觀察,必要時(shí)再換高倍鏡(二)小室培養(yǎng)觀察
將載玻片直接放低倍鏡下觀察,再換高倍鏡觀察。
觀察原則:
毛霉:用低倍鏡觀察孢子囊梗、囊軸等。用高倍鏡觀察孢子囊孢子的形
狀、大小。
根霉:菌絲、孢子同毛霉,注意觀察有無假根。
曲霉:在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜,分生孢子著生位置,辨認(rèn)分生孢
子梗、頂囊、小梗和分生孢子。
青霉:在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜,分生孢子梗、副枝、小梗和分生
孢子的形狀等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
分析與討論:
青霉和曲霉的形態(tài)有哪些異同?
青霉常分布在霉腐變質(zhì)的水果、蔬菜、糧食和皮革等物體上,菌體直立菌絲的頂端長有掃帚狀的結(jié)構(gòu),結(jié)構(gòu)的每一個(gè)分枝上,生有成串的孢子,成熟的孢子呈青綠色,進(jìn)行孢子生殖。
曲霉廣泛分布在谷物、空氣和土壤中,曲霉直立菌絲的頂端膨大成球狀,球狀結(jié)構(gòu)的表面放射狀地生有成串的孢子,孢子隨曲霉種類的不同而呈黃色、橙色或黑色。
從皮膚取材查真菌如何檢查?
微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告8
實(shí)驗(yàn)名稱:用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1.初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2.觀察高等植物的葉綠體在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布
二、實(shí)驗(yàn)原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運(yùn)動(dòng),改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強(qiáng)光灼傷。在強(qiáng)光下,葉綠體以其橢球體的側(cè)面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的.葫蘆蘚,其小葉內(nèi)葉綠體橢球體的形狀不完全一樣;罴(xì)胞中的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),觀察細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng),可以用細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運(yùn)動(dòng)做為標(biāo)志。
三、材料用具
蘚類的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養(yǎng)皿,鉛筆
四、實(shí)驗(yàn)過程(見書p30)
1.制作蘚類葉片的臨時(shí)裝片
2.用顯微鏡觀察葉綠體
3.制作黑藻葉片臨時(shí)裝片
4.用顯微鏡觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
五、討論
1.細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動(dòng),為什么?
2.葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?
3.植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),這對于活細(xì)胞完成生命活動(dòng)有什么意義?
4.用鉛筆畫一個(gè)葉片細(xì)胞,標(biāo)出葉綠體的大致流動(dòng)方向。
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