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生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告

時(shí)間:2023-11-28 11:18:33 雪桃 生物/化工/環(huán)保/能源 我要投稿
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關(guān)于生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告(通用10篇)

  在我們平凡的日常里,報(bào)告與我們的生活緊密相連,報(bào)告包含標(biāo)題、正文、結(jié)尾等。相信許多人會(huì)覺得報(bào)告很難寫吧,下面是小編整理的關(guān)于生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告,希望能夠幫助到大家。

關(guān)于生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告(通用10篇)

  生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告 1

  研究背景

  谷胱甘肽(glutathione, GSH) GSH具有多種重要生理功能, 抗自由基和抗氧化應(yīng)激作用, 保護(hù)細(xì)胞膜的完整性等。γ-GCS是植物細(xì)胞中GSH生物合成的限速酶, 可以調(diào)控GSH的生物合成量。GSH在生物體抵御冷害、干旱、重金屬、真菌等脅迫過程中起著重要作用, 說明γ-GCS也與植物抗逆過程密切相關(guān)。

  實(shí)驗(yàn)一 甘薯葉片RNA提取

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>

  1.了解真核生物RNA提取的原理;

  2.掌握Trizol提取的方法和步驟。

  二、實(shí)驗(yàn)原理

  Trizol 試劑是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的單相的快速抽提總RNA的試劑,在勻漿和裂解過程中,能在破碎細(xì)胞、降解細(xì)胞其它成分的同時(shí)保持RNA的完整性。TRIzol的'主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細(xì)胞,使細(xì)胞中的蛋白,核酸物質(zhì)解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質(zhì),但不能完全抑制RNA酶活性,因此TRIzol中還加入了8-羥基喹啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內(nèi)源和外源RNase(RNA酶)。0.1%的8-羥基喹啉可以抑制RNase,與氯仿聯(lián)合使用可增強(qiáng)抑制作用。異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類強(qiáng)力的蛋白質(zhì)變性劑,可溶解蛋白質(zhì)并使蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)消失,導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)降解,核蛋白迅速與核酸分離。β-巰基乙醇的主要作用是破壞RNase蛋白質(zhì)中的二硫鍵。在氯仿抽提、離心分離后,RNA處于水相中,將水相轉(zhuǎn)管后用異丙醇沉淀RNA。用這種方法得到的總 RNA中蛋白質(zhì)和DNA污染很少。

  三、實(shí)驗(yàn)材料

  1.材料

  甘薯(Ipomoea batatas Lam)葉片,品種為徐薯18

  2.試劑

 、 無RNA酶滅菌水:加入0.01%的DEPC,處理過夜后高壓滅菌;

  ② Trizol試劑;

 、 氯仿;

 、 異丙醇、75%乙醇;

  ⑤ TBE緩沖液;

 、 上樣緩沖液(6×)

  3.儀器

  高壓滅菌鍋、微量移液器、臺(tái)式離心機(jī)、超凈工作臺(tái)、電泳儀、電泳槽、凝膠成像系統(tǒng)、1.5mL塑料離心管、槍頭和EP管架

  四、實(shí)驗(yàn)方法

  1.將葉片取出放入研缽中,加入適量液氮,迅速研磨成粉末,每50-100 mg植物葉片加入1 mL Trizol試劑,室溫放置5 min,使樣品充分裂解;

  2.每1 mL Trizol試劑加入200 μL氯仿,用手劇烈振蕩混勻后室溫放置3-5 min使其自然分相;

  3.4℃ 12,000 rpm 離心15 min,吸取上層水相轉(zhuǎn)移到新管中;在上清中加入等體積冰冷的異丙醇,室溫放置15 min;

  4.4℃ 12,000 rpm 離心10 min,棄上清,RNA沉淀于管底;

  5.RNA沉淀中加入1 mL 75%的乙醇(用RNase-free水配制),溫和震蕩離心管,懸浮沉淀; 4℃ 8,000 rpm離心2 min,棄上清;

  6.室溫放置10 min晾干沉淀;

  7.沉淀中加入20μL RNase-free ddH2O,輕彈管壁,以充分溶解RNA,-70℃保存;

  8.用1%的瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測(cè),用EB染色并照相。

  五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

  1.RNA提取結(jié)果

  依照Trizol 試劑盒方法,提出的RNA較少,此部分未以圖或數(shù)據(jù)顯示。

  2.RNA后電泳結(jié)果

  其中9a為本組實(shí)驗(yàn)結(jié)果。由圖可知RNA條帶非常模糊,拖尾現(xiàn)象嚴(yán)重,幾乎無法分清具體條帶,亮度較大。點(diǎn)樣孔附近的紅色部分為雜質(zhì),在提取過程中并未很好除去。

  RNA提取跑膠結(jié)果。其中1泳道為樣品Marker,9a泳道為本小組RNA樣品。與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照可見條帶模糊,拖尾現(xiàn)象嚴(yán)重。

  六、分析與討論

  1.RNA的提取

  產(chǎn)量并不多,可能是因裂解樣品不充分或RNA沉淀未完全溶解所致。在實(shí)驗(yàn)過程中,由于對(duì)操作時(shí)間的掌握不熟練、操作技巧不完善,留上清與棄上清時(shí)令RNA損失了部分,使最終RNA產(chǎn)量不理想。

  2.RNA電泳結(jié)果

  有EB存在時(shí),電泳后28S rRNA和18S rRNA在紫外燈下應(yīng)看得很清楚,另出現(xiàn)條由tRNA,5.8S rRNA和5S rRNA組成的較模糊、遷移較快的帶。如果RNA沒有降解,則28S rRNA的亮度應(yīng)為18S rRNA的2倍,且這兩條帶都無彌散現(xiàn)象發(fā)生。由圖1.9a可知,RNA拖尾現(xiàn)象嚴(yán)重,說明RNA已大部分被降解;此外點(diǎn)樣孔附近出現(xiàn)紅色部分雜質(zhì),分析可能有并未除盡的蛋白質(zhì),同樣影響RNA電泳結(jié)果。

  在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),本小組成員未嚴(yán)格戴上口罩并勤換手套,這可能使外源RNAase進(jìn)入樣品,導(dǎo)致其降解嚴(yán)重。另外,提取出RNA后本小組未立即將樣品放入-70℃保存,也為導(dǎo)致結(jié)果不理想的重要原因之一。在最初用氯仿萃取分層的過程中,由于水相吸取過多,摻雜入部分蛋白質(zhì)雜質(zhì)而未于后續(xù)純化步驟除盡,RNA條帶拖尾嚴(yán)重可能還受該蛋白質(zhì)影響。

  七、總結(jié):

  本次試驗(yàn)RNA提取非常失敗,從跑膠結(jié)果可見其降解嚴(yán)重。雖然大實(shí)驗(yàn)無法避免試劑交叉污染的可能性,且電泳用膠的質(zhì)量也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,但從圖1.2a,3a,2b等條帶較為清晰的小組實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,瓊脂糖凝膠質(zhì)量以及試劑對(duì)結(jié)果干擾不大。那么本小組成員在提取過程中的操作一定出現(xiàn)了很大失誤。首先口罩、手套應(yīng)該嚴(yán)格按規(guī)定佩戴,提取過程對(duì)移液槍等儀器使用需謹(jǐn)慎仔細(xì),盡量避免混入雜質(zhì)。其次為排除部分雜質(zhì)影響可對(duì)RNA樣品用紫外線分光光度計(jì)測(cè)定吸光值檢驗(yàn),將有助于結(jié)果分析。最后,細(xì)節(jié)決定成敗,我們應(yīng)汲取教訓(xùn)避免接下來的實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)類似問題。

  實(shí)驗(yàn)二 第1鏈cDNA的合成和模板的驗(yàn)證

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

  1.掌握第1鏈cDNA的合成方法和步驟

  二、實(shí)驗(yàn)原理

  真核生物基因多為斷裂基因,編碼區(qū)不連續(xù),需經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工才能成為成熟mRNA。以真核成熟mRNA為模板合成cDNA,進(jìn)而獲得有連續(xù)氨基酸編碼的DNA序列,無需轉(zhuǎn)錄后加工,即可在原核細(xì)胞中表達(dá)。

  真核生物的mRNA都有PolyA尾巴。引物:Oligo dT(12-18個(gè)T)。莫洛尼

  氏鼠白血病毒逆轉(zhuǎn)錄酶(M-MLV )以單鏈RNA為模板,在引物的引發(fā)下合成與模板互補(bǔ)的DNA鏈(cDNA)。

  mRNA 反轉(zhuǎn)錄生成的cDNA可作為PCR的模板進(jìn)行擴(kuò)增稱為RT-PCR,RT-PCR比Northern雜交更靈敏,對(duì)RNA的質(zhì)量要求較低,操作簡(jiǎn)便,它是在轉(zhuǎn)錄水平上檢測(cè)基因時(shí)空表達(dá)的常用方法。

  三、實(shí)驗(yàn)材料

  1.材料

  徐薯18葉片RNA樣品

  2.試劑

 、 dNTP mixture(10 mM each);

 、 Oligo (dT) Primer (10 μM);

  ③ Total RNA;

 、 RNase free ddH2O;

  ⑤ M-MLV 反轉(zhuǎn)錄酶;

 、 5×First-strand Buffer;

 、 0.1 M DTT;

 、 Ribonuclease Inhibitor (40 U/μL)

  3.儀器

  10μL 和100μL 的移液槍、0.5mL的EP管、PCR儀等

  四、實(shí)驗(yàn)方法

  1.在RNase free Microtube 管中配制下列混合液:

  dNTP mixture(10 mM each)1 μL

  *Oligo (dT) Primer (10 μM) 4 μL

  Total RNA2 μL

  生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告 2

  (第一部分)

  實(shí)驗(yàn)一 工作液的配制、培養(yǎng)基配制、器皿洗滌及滅菌

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

  掌握各種工作液配制方法;了解植物培養(yǎng)基的構(gòu)成及配制方法;掌握高溫高壓滅菌的方法。

  二、原理

  培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)的基本條件,同時(shí)也是關(guān)鍵因素。

  濕熱條件(121℃的蒸汽,10分鐘)能夠有效地殺滅附著在玻璃器皿、器具以及溶液和培養(yǎng)基中的微生物達(dá)到滅菌的目的。

  三、器具和試劑

  滅菌鍋,天平,電爐,微波爐,三角瓶,封口膜,移液管,移液器,量筒,燒杯,pH試紙,培養(yǎng)皿,濾紙,Parafilm封口膜。

  瓊脂,MS培養(yǎng)基大量元素,無菌水,葡萄糖,2, 4-D,IBA,KT (激動(dòng)素),1M NaOH及HCl,卡那霉素,頭孢霉素,乙酰丁香酮 。

  四、 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

  PH調(diào)節(jié)劑的配制、培養(yǎng)基母液的配制、培養(yǎng)基的配制、各種相關(guān)物品的準(zhǔn)備

 。ㄒ唬┡囵B(yǎng)基的配制步驟

  1、取個(gè)干凈燒杯,加入1/3-2/3左右的蒸餾水,用移液管取所需的母液加入燒杯。

  2、稱取定量的蔗糖加入燒杯中并不斷攪拌,直到完全溶解,定容。

  3、用NaOH或者 稀HCL調(diào)劑酸堿值。

  4、稱取定量瓊脂糖加入燒杯中,加熱煮沸攪拌,待瓊脂完全溶解,分裝。

  5、高壓滅菌(121℃,15min-20min)。

  6、冷卻,取出,備用。

 。ǘ┟藁o菌苗培養(yǎng)基的制備

  1、取25 ml MS大量元素母液,稱取葡萄糖15g、于1升的燒杯中,定容后調(diào)pH值為6.0,加入7.5g/l 瓊脂煮沸。

  2、然后將其分裝到100毫升的三角瓶中,每瓶40毫升。

  3、用封口膜封口后在滅菌鍋中滅菌15分鐘。

  4、滅菌后臵于水平的工作臺(tái)上冷卻即可。

  要求:配制 1L

 。ㄈ⿺M南芥無菌苗培養(yǎng)基的制備

  1、擬南芥無菌苗培養(yǎng)基:1/2 MS大量元素+蔗糖10g/L,PH值6.0;加入7.5g瓊脂高溫高壓滅菌。

  2、0.1%瓊脂糖:0.1g瓊脂糖/100ml 蒸餾水;無菌苗培養(yǎng)基和0.1%瓊脂糖均121°高壓滅菌15分鐘。

  3、另準(zhǔn)備20套9cm培養(yǎng)皿,滅菌。

  要求:配制0.5L,裝1瓶滅菌,滅菌后培養(yǎng)基倒皿。

  五、注意事項(xiàng)

  1、為了盡量減少人為的誤差,必須嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行操作,嚴(yán)格按照要求的量來配制工作液、母液及培養(yǎng)基。

  2、應(yīng)當(dāng)把培養(yǎng)基中的.各種成分都寫在紙上,加進(jìn)去一個(gè)以后即劃掉一個(gè)。

  3、所有裝著培養(yǎng)基的試管、玻璃罐、玻璃瓶和培養(yǎng)皿等都應(yīng)當(dāng)清楚地做上標(biāo)記。

  4、每小組的操作的具體事項(xiàng)請(qǐng)參照黑板上貼的任務(wù)分組。

  5、愛護(hù)實(shí)驗(yàn)儀器及耗材,小心使用玻璃器皿,合理滅菌,因?yàn)闇缇臅r(shí)較長(zhǎng)。

  實(shí)驗(yàn)二 無菌苗的制備

  一、原理

  化學(xué)滅菌:0.1%升汞(Hgcl2)溶液浸泡10分鐘可以對(duì)棉花種子等外植體進(jìn)行滅菌,84消毒液(2%的次氯酸鈉)浸泡3分鐘可以對(duì)擬南芥等小種子外植體進(jìn)行消毒。 物理消毒:紫外燈消毒、酒精燈火焰或高溫?zé)?min左右可有效殺死鑷子、剪刀等不銹鋼操作器具的菌類達(dá)到消毒的目的。

  二、實(shí)驗(yàn)材料、器具和試劑

  棉花品種YZ1;擬南芥col-0野生型 滅菌鍋,天平,電爐,三角瓶,封口膜,鑷子,酒精燈,剪刀,移液管,超凈工作臺(tái)。

  0.1%升汞溶液,84消毒液,75%酒精

  三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

 。ㄒ唬⿺M南芥無菌苗培養(yǎng)基倒皿

  1.取上次滅菌好的擬南芥培養(yǎng)基(500ml裝),稍微擰松瓶蓋,微波爐煮沸,邊煮邊搖動(dòng),至全部融化。

  2.將上次滅菌好的9cm培養(yǎng)皿分開放臵超凈工作臺(tái)(超凈工作臺(tái)需先打開)上。

  3.將融化好的培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中(500ml/18-20皿),將皿至于超凈臺(tái)上吹干.。

 。ǘ┕才囵B(yǎng)培養(yǎng)基的配制

  成分?jǐn)?shù)量 成分 數(shù)量

  MS大量元素 (20倍) 50 ml 2,4-D (0.1mg/ ml)1 ml

  NH4NO3 (20倍) 50 ml 甘氨酸(1000倍)1 ml

  微量元素 (100倍)10 ml KT(0.1mg/ml)1 ml

  鐵鹽 (100倍) 10 ml 葡萄糖 30g/L

  微生素(1000倍) 1 mlPH值5.85-5.90 肌醇 (100倍) 1 ml

  依次加入上述物質(zhì),調(diào)PH值5.85-5.90,然后分裝至2個(gè)500ml藍(lán)蓋瓶,每瓶加入4g瓊脂,滅菌,滅菌后倒皿。

 。ㄈ┻x擇培養(yǎng)基的配制

  共培養(yǎng)培養(yǎng)基 +卡那霉素50mg/L + 頭孢霉素400 mg/L

  滅菌后,待培養(yǎng)基涼至60度左右加入,混勻,倒皿。

 。ㄋ模┟藁o菌苗的制備

  1、將棉籽用手術(shù)剪刀去殼(每人3顆,飽滿無病蟲害種子)。

  2、用0.1%的升汞滅菌13分鐘。

  3、無菌水沖洗三遍,接種于無菌苗培養(yǎng)基中。

  4、28℃條件下暗培養(yǎng)7天 (304培養(yǎng)箱)。

 。ㄎ澹⿺M南芥無菌苗的制備

  大量法滅菌:將擬南芥種子放入1.5ml離心管中,加入84消毒液:無菌水=1:1的混合液1ml,上下?lián)u晃滅菌2min,棄消毒液;加入1ml 75%的酒精混勻1min,然后無菌水清洗4次;加入0.1%瓊脂糖溶液懸浮種子,用移液槍涂布于擬南芥無菌苗培養(yǎng)基,

  吹干,封口。弱光培養(yǎng)兩天至種子萌發(fā),轉(zhuǎn)至光照培養(yǎng)室培養(yǎng)兩周(304培養(yǎng)箱)。

  五、注意事項(xiàng)

  所有操作(除數(shù)種子)均在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行。

  六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

  一周后觀察無菌苗的生長(zhǎng)狀況

  1、六瓶接種的棉花無菌苗中有一瓶被輕度污染,其余五瓶生長(zhǎng)狀況良好。

  2、擬南芥的無菌苗因涂布不均勻長(zhǎng)勢(shì)一般,幼苗較其他小組要弱小,葉片顏色較深。

  實(shí)驗(yàn)三 愈傷組織的誘導(dǎo)及農(nóng)桿菌介導(dǎo)的棉花遺傳轉(zhuǎn)化

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

  掌握植物體細(xì)胞胚胎發(fā)生的基本理論;了解植物愈傷組織在誘導(dǎo)和分化過程中的形態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)特征;進(jìn)一步鞏固植物離體培養(yǎng)和無菌操作的步驟;掌握植物遺傳轉(zhuǎn)化的方法、理論;掌握根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)。

  二、實(shí)驗(yàn)原理

  植物細(xì)胞全能性:植物的每個(gè)細(xì)胞都包含著該物種的全部遺傳信息,從而具備發(fā)育成完整植株的遺傳能力。

  愈傷組織:

  胚性愈傷:呈淡黃色或者黃綠色,質(zhì)地較均勻;細(xì)胞球狀或近球狀,細(xì)胞核大,細(xì)胞質(zhì)濃

  非胚性愈傷:呈褐色、白色粉末狀或白色、綠色堅(jiān)硬塊狀 ;細(xì)胞一般為長(zhǎng)柱狀等非規(guī)則形狀,細(xì)胞核小,細(xì)胞質(zhì)較稀 。

  農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)基因的原理:植物細(xì)胞在受傷后,創(chuàng)傷分子誘導(dǎo)農(nóng)桿菌Vir區(qū)各種基因的激活和表達(dá),導(dǎo)致T-DNA被剪切,加工,形成T-鏈蛋白復(fù)合體(T-復(fù)合體),通過農(nóng)桿菌和植物細(xì)胞的細(xì)胞膜,細(xì)胞壁進(jìn)入植胞內(nèi),T-復(fù)合體上的核靶向序列可引導(dǎo)T-DNA整合到植物基因組。

  三、材料與用品

  1、實(shí)驗(yàn)材料:棉花材料YZ1(上周做的無菌苗)、農(nóng)桿菌菌株LBA4404。

  2、用具: 超凈工作臺(tái), 顯微鏡,載玻片,天平,三角瓶,封口膜,橡皮筋,鑷子,酒精燈,培養(yǎng)皿,濾紙,剪刀,醫(yī)用手術(shù)刀,搖床。

  3、藥品:誘導(dǎo)、共培養(yǎng)培養(yǎng)基,卡寶品紅染色液,MGL活化培養(yǎng)基,LB培養(yǎng)基,乙酰丁香酮(AS)。

  四、實(shí)驗(yàn)步驟

 。ㄒ唬┟藁ㄓ鷤M織的誘導(dǎo)及觀察

  1、愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配制(第1周已做)

  2、無菌苗的制備

  3、無菌苗的切取:選取培養(yǎng)7天左右健壯的無菌苗臵于墊有濾紙的培養(yǎng)皿上,用解剖刀切掉子葉及生長(zhǎng)點(diǎn),切掉胚根及相連的約1/4的下胚軸,余下的下胚軸用作愈傷組織誘導(dǎo)的外植體,用解剖刀將下胚軸切成~0.7cm小段。

  4、外植體接種及離體培養(yǎng):將切離好的外植體接種于愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基上(每瓶約7段),平行放臵,28℃光照培養(yǎng),每天14小時(shí)光照,進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)及增殖培養(yǎng)。

  5、愈傷組織繼代(一個(gè)月后):待培養(yǎng)一個(gè)月左右,將增殖后的愈傷組織連同下胚軸切斷繼代到分化培養(yǎng)基上,進(jìn)行胚性愈傷組織的分化。

  6、愈傷組織形態(tài)觀察:分別挑取少量非胚性愈傷和胚性愈傷組織,臵于載玻片上,滴幾滴清水用鑷子搗碎愈傷組織,然后滴加一滴卡寶品紅染色數(shù)秒鐘后,在顯微鏡下觀察比較兩者細(xì)胞學(xué)特征。

 。ǘ┺r(nóng)桿菌介導(dǎo)的棉花下胚軸的遺傳轉(zhuǎn)化

  1、共培養(yǎng)及選擇培培養(yǎng)基的配制(第2周已做,沒倒皿的組倒皿)

  2、無菌苗的制備(第2周已做)

  3、農(nóng)桿菌的活化(研究生幫忙做):從超低溫冰箱內(nèi)取出保存菌株的甘油管在冰上融化;按1:100的體積加入20ml LB液體培養(yǎng)基里搖菌,28℃暗培養(yǎng)36-48hr;將渾濁的農(nóng)桿菌液涂布于LB平皿上,28℃暗培養(yǎng)36-48hr;把培養(yǎng)基表面菌落刮入裝有20ml MGL培養(yǎng)基的三角瓶中(按1/1000比例加入AS),28℃、200rpm搖30min;OD值在0.5-1.5之間(估計(jì))即可用于侵染。

  4、下胚軸與農(nóng)桿菌共培養(yǎng):把無菌苗切成~7mm莖段(同誘導(dǎo)程序),用鑷子夾到經(jīng)活化的菌液中進(jìn)行侵染,搖勻,侵染10分鐘;倒掉菌液,將下胚軸轉(zhuǎn)入裝有濾紙的滅菌培養(yǎng)皿中,吹5分鐘使表面稍為干燥;再將下胚軸分散布于墊有濾紙的共培養(yǎng)培養(yǎng)基中,19-21℃, 暗培養(yǎng)48-60小時(shí)結(jié)束共培養(yǎng)。

  5、選擇培養(yǎng)(48-60小時(shí)后):把經(jīng)過共培養(yǎng)的下胚軸用鑷子轉(zhuǎn)入選擇培養(yǎng)基中,培養(yǎng)30天左右繼代一次轉(zhuǎn)入相同的選擇培養(yǎng)基中。

  五、注意事項(xiàng)

  1、在切無菌苗時(shí),一定要使用鋒利的刀片,盡量做到一刀能切斷,避免擠壓莖段。

  2、無菌苗培養(yǎng)時(shí)間不宜過長(zhǎng)(培養(yǎng)七天最好)。

  3、從超低溫冰箱內(nèi)取出的甘油管,應(yīng)盡量減少其在冰箱外的時(shí)間,用完后盡快放回冰箱。

  4、侵染時(shí)下胚軸稍為干燥可以增加農(nóng)桿菌的吸附。

  5、共培養(yǎng)后第一次進(jìn)行選擇培養(yǎng)時(shí)應(yīng)盡量使培養(yǎng)的環(huán)境保持干燥,可以減少農(nóng)桿菌的污染。

  6、整個(gè)過程均為無菌操作環(huán)境。

  六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

  1.錐形瓶與平皿中的下胚軸生長(zhǎng)狀況均良好,觀察到平皿中農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化的下胚軸有發(fā)黑的現(xiàn)象,而錐形瓶中誘導(dǎo)的愈傷組織則無發(fā)黑現(xiàn)象。

  2.兩個(gè)平皿中的擬南芥均生長(zhǎng)緩慢且幼葉發(fā)黃,推測(cè)原因可能與雜菌感染有關(guān)。

  生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告 3

  一、實(shí)驗(yàn)名稱

  用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)

  二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>

  1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。

  2、觀察高等植物的葉綠體在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布

  三、實(shí)驗(yàn)原理

  高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運(yùn)動(dòng),改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強(qiáng)光灼傷。在強(qiáng)光下,葉綠體以其橢球體的側(cè)面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的`葫蘆蘚,其小葉內(nèi)葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。活細(xì)胞中的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),觀察細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng),可以用細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運(yùn)動(dòng)做為標(biāo)志。

  四、材料用具

  蘚類的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養(yǎng)皿,鉛筆

  五、實(shí)驗(yàn)過程(見書p30)

  1、制作蘚類葉片的臨時(shí)裝片

  2、用顯微鏡觀察葉綠體

  3、制作黑藻葉片臨時(shí)裝片

  4、用顯微鏡觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)

  六、討論

  1、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動(dòng),為什么?

  2、葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?

  3、植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),這對(duì)于活細(xì)胞完成生命活動(dòng)有什么意義?

  4、用鉛筆畫一個(gè)葉片細(xì)胞,標(biāo)出葉綠體的大致流動(dòng)方向。

  生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告 4

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>

  1. 初步學(xué)會(huì)觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原的方法。

  2. 理解植物細(xì)胞發(fā)生滲透作用的原理。

  二、實(shí)驗(yàn)原理

  當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進(jìn)入外界溶液中,使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大,當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí),原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁逐漸分離開,也就是分升了質(zhì)壁分離當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時(shí),外界溶液中的水分就透過原生質(zhì)層進(jìn)入細(xì)胞液中,整個(gè)原生質(zhì)層就會(huì)慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài),使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。

  三、材料用具

  紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液

  四、實(shí)驗(yàn)過程(見書P60)

  物理實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ——化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ——生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ——實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式 ——實(shí)驗(yàn)報(bào)告模板

  五、討論

  1.如果將洋蔥表皮細(xì)胞浸潤(rùn)在與細(xì)胞液濃度相同的`蔗糖溶液中,這些表皮細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象?

  2.當(dāng)紅細(xì)胞細(xì)胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時(shí),紅細(xì)胞會(huì)不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象?為什么?

  3.畫一個(gè)細(xì)胞在正常狀態(tài)下到經(jīng)過0.3g/ml蔗糖溶液處理,再經(jīng)過清水處理的細(xì)胞變化的一系列模式圖。

  生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告 5

  實(shí)驗(yàn)教師:xxx

  所在學(xué)校:xxx中學(xué)

  目的要求:

  1練習(xí)徒手切片

  2認(rèn)識(shí)葉片的結(jié)構(gòu)

  3畫葉片的表皮細(xì)胞和保衛(wèi)細(xì)胞

  材料用具:

  新鮮葉片(如菠菜、槐樹、蠶豆的葉片),顯微鏡,雙面刀片(兩片、并在一起、一側(cè)用膠布粘牢)、鑷子、載玻片、蓋玻片、葉片的永久切片、盛有清水的培養(yǎng)皿、滴管、吸水紙、碘液、紗布、毛筆、小木板。

  方法步驟

  方法與步驟要點(diǎn)

  注意事項(xiàng)

 。ㄒ唬┚毩(xí)徒手切片,制作葉片橫切片的臨時(shí)切片

  1將新鮮的葉片平放在小木板上。

  2右手捏緊并排的兩片刀片,沿著圖中虛線的方向,迅速切割。

  3把刀片夾縫中存在的切下的薄片放入盛有清水培養(yǎng)皿中。要多切幾次(每切一次,刀片要蘸一下水)。

  4用毛筆蘸出最薄的一片,制成臨時(shí)切片。葉片下面要墊上小塊木板,以防損壞桌面。刀片要捏緊,切割速度要快,注意安全。

  為了便于觀察,載玻片的水滴中可以同時(shí)放幾片葉的橫切片,選擇切得最薄的一片用來觀察。

 。ǘ┯^察葉片的結(jié)構(gòu)

  1.用顯微鏡先觀察葉片橫切面的臨時(shí)切片,再觀察葉片的永久橫切片。

  2.觀察時(shí)注意分清時(shí)的表皮、葉肉和葉脈。

  仔細(xì)觀察上、下表皮細(xì)胞的區(qū)別

 。ㄈ┯^察葉片的'下表皮

  1.用鑷子撕下一小塊葉片的下表皮,制成臨時(shí)裝片。

  2.用顯微鏡進(jìn)行觀察,下表皮細(xì)胞的形態(tài)是什么樣子的,下表皮上有沒有氣孔?

  撕取下表皮時(shí),一定要薄,否則影響觀察效果。

  注意觀察氣孔的結(jié)構(gòu)。

 。ㄋ模┊媹D

  在下面空白處畫出下表皮上一對(duì)保衛(wèi)細(xì)胞及周圍的幾個(gè)表皮細(xì)胞,這一對(duì)保衛(wèi)細(xì)胞要詳細(xì)畫,周圍的細(xì)胞只需勾出輪廓。

  畫圖時(shí),要真實(shí)、實(shí)事求是。

  討論與交流

  1.保衛(wèi)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)對(duì)植物的蒸騰作用有什么意義?

  2.從結(jié)構(gòu)上看,葉片有哪些方面是適于接受陽(yáng)光的?

  生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告 6

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>

  1、掌握顯示細(xì)胞中過氧化物酶反應(yīng)的原理和方法。2.了解細(xì)胞凋亡的生物學(xué)意義

  3、掌握凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)檢測(cè)方法

  二、實(shí)驗(yàn)原理:

  1、細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物,用聯(lián)苯胺處理標(biāo)本,細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色的聯(lián)苯胺藍(lán),進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物,因而可以根據(jù)顏色反應(yīng)來判定過氧化物酶的'有無或多少。中間產(chǎn)物藍(lán)色聯(lián)苯胺是不穩(wěn)定的,無需酶的參加即可氧化為棕色化合物。

  2、細(xì)胞凋亡是指細(xì)胞在生理或病理?xiàng)l件下,遵循自身的程序,自己結(jié)束其生命的過程。它是一個(gè)主動(dòng)的、高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過程。

  3、凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體;根據(jù)細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行顯微觀察是檢測(cè)細(xì)胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。

  三、實(shí)驗(yàn)步驟:

  細(xì)胞中過氧化物酶的顯示

  1、在載片上滴一滴PBS緩沖液;

  2、取骨髓細(xì)胞:用斷頸法處死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剝出后肢股骨,剪開股骨一端,用牙簽尖的一端插入剪開的小孔中,摳取少許骨髓細(xì)胞置滴有PBS的載片上;

  3、涂片:用另一玻片將骨髓細(xì)胞沿一個(gè)方向涂布推開,室溫晾干;

  4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸銅液,以蓋滿涂片為宜,處理30秒-1分鐘。5、傾去硫酸銅液,直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應(yīng)6分鐘(以蓋滿涂片為宜)6、清水沖洗,番紅復(fù)染2min。

  7、鏡檢:清水沖洗,室溫晾干,先低倍鏡下觀察,后換高倍鏡下觀察(油鏡100×)

  細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測(cè)與觀察吉姆薩染色:

  1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞3、95%乙醇固定5min

  4、PBS緩沖液洗2次

  5、吉姆薩染色液染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液

  7、普通光學(xué)顯微鏡下觀察。吖啶橙染色:

  1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞

  3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min4、PBS緩沖液洗2次每次1min

  5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液

  6、選用藍(lán)光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀察。

  四、結(jié)果與分析:

  1、根據(jù)隨機(jī)選擇的幾個(gè)視野的統(tǒng)計(jì),該樣品的細(xì)胞凋亡率=227/506×100=44.9

  Hela細(xì)胞凋亡過程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化(吖啶橙染色)

  五、思考題:

  1、細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制

  細(xì)胞凋亡是一個(gè)受基因調(diào)控、眾多細(xì)胞膜受體和胞漿蛋白參與的細(xì)胞主動(dòng)自殺過程,其觸發(fā)因素多種多樣,包括細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)因子和抑制因子對(duì)細(xì)胞凋亡的調(diào)控。

  2、細(xì)胞凋亡的特征

  凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體。

  3、研究細(xì)胞凋亡的方法

  定性的研究方法:常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場(chǎng)倒轉(zhuǎn)瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學(xué)觀察(普通光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)

  定量或半定量的研究方法:各種流式細(xì)胞儀方法、原位末端標(biāo)記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。

  生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告 7

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>

  1、通過對(duì)原核和真核各種形態(tài)細(xì)胞的光學(xué)顯微鏡觀察,了解細(xì)胞的形態(tài)及其顯微結(jié)構(gòu);

  2、學(xué)習(xí)顯微測(cè)量的方法,對(duì)細(xì)胞的大小有一直觀認(rèn)識(shí)。

  二、實(shí)驗(yàn)材料和儀器:

  小白鼠肝細(xì)胞切片;雞血紅細(xì)胞;蠶豆葉片橫切片;

  普通光學(xué)顯微鏡;目鏡測(cè)微尺;鏡臺(tái)測(cè)微尺;載玻片;蓋玻片。

  三、實(shí)驗(yàn)步驟:

  (一)細(xì)胞形態(tài)觀察

  l、動(dòng)物細(xì)胞的觀察

 。1)人肝細(xì)胞切片:在顯微鏡下仔細(xì)觀察肝細(xì)胞的形態(tài)構(gòu)造。

 。2)雞血細(xì)胞涂片的觀察:觀察血細(xì)胞的組成;紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板的形態(tài)特點(diǎn)。

  2、植物細(xì)胞的觀察

  取蠶豆葉片橫切片的觀察:注意表皮細(xì)胞和葉肉細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)。

  (二)細(xì)胞的大小和測(cè)量

  1、卸下目鏡的上透鏡,將目鏡測(cè)微尺刻度向下裝在目鏡的'焦平面上,再旋上目鏡的上透鏡。

  2、將鏡臺(tái)測(cè)微尺刻度向上放在鏡臺(tái)上夾好,使測(cè)微尺分度位于視野中央。調(diào)焦至能看清鏡臺(tái)測(cè)微尺的分度。

  3、小心移動(dòng)鏡臺(tái)測(cè)微尺和轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡測(cè)微尺(如目鏡測(cè)微尺分度模糊,可轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡上透鏡進(jìn)行調(diào)焦),使兩尺左邊的一直線重合,然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。

  4、記錄兩條重合線間目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)。按下式計(jì)算目鏡測(cè)微尺每格等于多少μm:

  鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)

  目鏡測(cè)微尺每格的微米數(shù)=————————— × 10

  目鏡測(cè)微尺的格數(shù)

  四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

  1、目鏡校正:40倍顯微鏡目鏡測(cè)微尺每格的微米數(shù)=17/70=0.24

  2、細(xì)胞大小的測(cè)量:

  五、作業(yè)與思考:

  1、血細(xì)胞按含量高低,主要含有:紅細(xì)胞,白細(xì)胞,血小板。

  白細(xì)胞最大,紅細(xì)胞次之,血小板最小。紅細(xì)胞:主要的功能是運(yùn)送氧。 白細(xì)胞:主要扮演了免疫的角色,當(dāng)病菌侵入人體時(shí),白細(xì)胞能穿過毛細(xì)血管壁,集中到病菌入侵部位,將病菌包圍,吞噬。血小板:止血過程中起著重要作用。細(xì)胞形態(tài)見下圖。

  2、植物細(xì)胞一般比動(dòng)物細(xì)胞大一些。形態(tài)圖見下。

  3、在不同放大倍數(shù)下,測(cè)定的細(xì)胞大小基本一致,但有一些偏差。放大倍數(shù)越大,在視野中同等實(shí)際距離下的兩點(diǎn)視野距離更大,而更容易測(cè)量準(zhǔn)確。

  生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告 8

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>

  1.初步學(xué)會(huì)探索酶催化特定化學(xué)反應(yīng)的方法。

  2.探索淀粉酶是否只能催化特定的化學(xué)反應(yīng)。

  二、實(shí)驗(yàn)原理

  淀粉和蔗糖都是非還原糖,它們?cè)诿傅拇呋饔孟露寄芩獬蛇原糖,還原糖能夠與斐林試劑發(fā)生氧化還原反應(yīng),生成磚紅色的`氧化亞銅沉淀。

  用淀粉酶分別催化淀粉溶液和蔗糖溶液,再用斐林試劑鑒定溶液中有無還原糖,就可以看出淀粉酶是否能催化這兩種化學(xué)反應(yīng)。

  三、材料用具

  滴管、試管、火柴、試管架、溫度計(jì)、三腳架、石棉網(wǎng)、酒精燈、燒杯、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的新鮮淀粉酶溶液、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的可溶性淀粉溶液、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的蔗糖溶液、斐林試劑

  四、實(shí)驗(yàn)過程

 。ㄒ姇47)

  五、討論

  1.制備的可溶性淀粉溶液,必須完全冷卻后才能使用。為什么?

 。.兩支試管保溫時(shí),為什么要控制在60℃左右(低于50℃或高于75℃)?

  3.如果2號(hào)試管也產(chǎn)生了磚紅色沉淀,可能是由哪些原因造成的?

  生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告 9

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>

  1、學(xué)會(huì)如何使用顯微鏡觀察細(xì)胞;

  2、了解細(xì)胞的結(jié)構(gòu);

  3、學(xué)會(huì)制作臨時(shí)裝片。

  二、實(shí)驗(yàn)材料:(實(shí)驗(yàn)材料可換)松針、動(dòng)物血液、動(dòng)物神經(jīng)細(xì)胞永久裝片

  三、實(shí)驗(yàn)用具: 載玻片、蓋玻片、蒸餾水、滴管、鑷子、土豆、刀片、顯微鏡(物鏡5X、10X、40X)

  四、方法步驟:

  1、制作松針的臨時(shí)切片:

  (1)取干凈的載玻片一個(gè)平置于試驗(yàn)臺(tái)上,用滴管在載玻片中央滴一滴蒸餾水。

 。2)將土豆切成條狀(截面約:0.5X0.5cm)取兩條,將一根松針夾在兩個(gè)土豆條之間,用刀片削成盡量薄的薄片,削時(shí),手腕不動(dòng),靠大臂帶動(dòng)小臂移動(dòng)刀片。切片數(shù)次。從中選取較薄的切片,置于載玻片的水滴上。

 。3)從一側(cè)輕輕蓋上蓋玻片,不要產(chǎn)生氣泡。用吸水紙輕輕吸去蓋玻片周圍的水滴,即完成臨時(shí)切片的制作。

  2、觀察切片:

 。1)取出顯微鏡,置于試驗(yàn)臺(tái)上靠左的位置,打開光源。

 。2) 將上步制作好的切片置于顯微鏡的`載物臺(tái)上,調(diào)整載物臺(tái)位置,使蓋玻片對(duì)準(zhǔn)光源。

 。3)使用5X物鏡觀察切片,使松針切片在視野中心,換成10X物鏡,觀察松針葉面橫切結(jié)構(gòu)。

 。4)換成40X物鏡觀察,注意細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)結(jié)構(gòu),畫圖。

  3、動(dòng)物血液臨時(shí)裝片的制作及觀察(除了不用切片,其他類似)

  4、 動(dòng)物神經(jīng)細(xì)胞永久裝片的觀察。

  五、反思:

  1、松針的葉面結(jié)構(gòu)是什么樣的?

  2、動(dòng)物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)是什么樣的?與植物細(xì)胞又什么不同?

  3、顯微鏡的物鏡倍數(shù)愈大,視野的亮度如何?物體的大小如何?

  4、如何調(diào)節(jié)焦距?

  5、如何才能使切片盡量的?切片的厚薄對(duì)顯微鏡下觀察的效果有什么影響。

  生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告 10

  一、 實(shí)驗(yàn)室規(guī)則

  1.實(shí)驗(yàn)前應(yīng)認(rèn)真預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo),明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅瑢懗鲱A(yù)實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

  2.進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須穿白大衣。嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)課紀(jì)律,不得無故遲到或早退。不得高聲說話。嚴(yán)禁拿實(shí)驗(yàn)器具開玩笑。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止吸煙、用餐。

  3.嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)過程中自己不能解決或決定的問題,切勿盲目處理,應(yīng)及時(shí)請(qǐng)教指導(dǎo)老師。

  4.嚴(yán)格按操作規(guī)程使用儀器,凡不熟悉操作方法的儀器不得隨意動(dòng)用,對(duì)貴重的精密儀器必須先熟知使用方法,才能開始使用;儀器發(fā)生故障,應(yīng)立即關(guān)閉電源并報(bào)告老師,不得擅自拆修。

  5.取用試劑時(shí)必須“隨開隨蓋”,“蓋隨瓶走”,即用畢立即蓋好放回原處,切忌“張冠李戴”,避免污染。

  6.愛護(hù)公物,節(jié)約水、電、試劑,遵守?fù)p壞儀器報(bào)告、登記、賠償制度。

  7.注意水、電、試劑的使用安全。使用易燃易爆物品時(shí)應(yīng)遠(yuǎn)離火源。用試管加熱時(shí),管口不準(zhǔn)對(duì)人。嚴(yán)防強(qiáng)酸強(qiáng)堿及有毒物質(zhì)吸入口內(nèi)或?yàn)R到別人身上。任何時(shí)候不得將強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫、有毒物質(zhì)拋灑在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。

  8.廢紙及其它固體廢物嚴(yán)禁倒入水槽,應(yīng)倒到垃圾桶內(nèi)。廢棄液體如為強(qiáng)酸強(qiáng)堿,必須事先用水稀釋,方可倒入水槽內(nèi),并放水沖走。

  9.以實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度如實(shí)記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果,仔細(xì)分析,做出客觀結(jié)論。

  實(shí)驗(yàn)失敗,須認(rèn)真查找原因,而不能任意涂改實(shí)驗(yàn)結(jié)果。實(shí)驗(yàn)完畢,認(rèn)真書寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告,按時(shí)上交。

  10.實(shí)驗(yàn)完畢,個(gè)人應(yīng)將試劑、儀器器材擺放整齊,用過的玻璃器皿應(yīng)刷洗干凈歸置好,方可離開實(shí)驗(yàn)室。值日生則要認(rèn)真負(fù)責(zé)整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的清潔和整理,保持實(shí)驗(yàn)整潔衛(wèi)生。離開實(shí)驗(yàn)室前檢查電源、水源和門窗的安全等,并嚴(yán)格執(zhí)行值日生登記制度。

  二、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的基本要求

  實(shí)驗(yàn)報(bào)告通過分析總結(jié)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果和問題,加深對(duì)有關(guān)理論和技術(shù)的理解與掌握,提高分析、綜合、概括問題的能力,同時(shí)也是學(xué)習(xí)撰寫研究論文的過程。

  1.實(shí)驗(yàn)報(bào)告應(yīng)該在專用的生化實(shí)驗(yàn)報(bào)告本上、按上述格式要求書寫。

  2.實(shí)驗(yàn)報(bào)告的前三部分

 、賹(shí)驗(yàn)原理

  ②實(shí)驗(yàn)材料(包括實(shí)驗(yàn)樣品、主要試劑、主要儀器與器材)

 、蹖(shí)驗(yàn)步驟(包括實(shí)驗(yàn)流程與操作步驟)要求在實(shí)驗(yàn)課前預(yù)習(xí)后撰寫,作為實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)報(bào)告的內(nèi)容。預(yù)習(xí)時(shí)也要考慮并設(shè)計(jì)好相應(yīng)實(shí)驗(yàn)記錄的表格。

  3.每項(xiàng)內(nèi)容的基本要求

 。1)實(shí)驗(yàn)原理:簡(jiǎn)明扼要地寫出實(shí)驗(yàn)的原理,涉及化學(xué)反應(yīng)時(shí)用化學(xué)反應(yīng)方程式表示。

 。2)實(shí)驗(yàn)材料:應(yīng)包括各種來源的生物樣品及試劑和主要儀器。說明化學(xué)試劑時(shí)要避免使用未被普遍接受的商品名和俗名。試劑要標(biāo)清所用的濃度。

  (3)實(shí)驗(yàn)步驟:描述要簡(jiǎn)潔,不能照抄實(shí)驗(yàn)講義,可以采用工藝流程圖的方式或自行設(shè)計(jì)的表格來表示,但對(duì)實(shí)驗(yàn)條件和操作的'關(guān)鍵環(huán)節(jié)應(yīng)寫清楚,以便他人重復(fù)。

 。4)實(shí)驗(yàn)記錄:包括主要實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)中觀察到的現(xiàn)象及實(shí)驗(yàn)中的原始數(shù)據(jù)。

 。5)結(jié)果(定量實(shí)驗(yàn)包括計(jì)算):應(yīng)把所得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果(如觀察現(xiàn)象)和數(shù)據(jù)進(jìn)行整理、歸納、分析、對(duì)比,盡量用圖表的形式概括實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,如實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組實(shí)驗(yàn)結(jié)果的比較表等(有時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果還可附以必要的說明)。

 。6)討論:不應(yīng)是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重述,而是以結(jié)果為基礎(chǔ)的邏輯推論。如對(duì)定性實(shí)驗(yàn),在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上應(yīng)有中肯的結(jié)論。還可以包括關(guān)于實(shí)驗(yàn)方法、操作技術(shù)和有關(guān)實(shí)驗(yàn)的一些問題,對(duì)實(shí)驗(yàn)異常結(jié)果的分析和評(píng)論,對(duì)于實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的認(rèn)識(shí)、體會(huì)和建議,對(duì)實(shí)驗(yàn)課的改進(jìn)意見等。

  (7)結(jié)論:一般實(shí)驗(yàn)要有結(jié)論,結(jié)論要簡(jiǎn)單扼要,說明本次實(shí)驗(yàn)所獲得的結(jié)果。

  三、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)(百分制)

  1.實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)報(bào)告內(nèi)容(30分)

  學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn),并書寫預(yù)習(xí)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)報(bào)告應(yīng)包括以下三部分:

  ①實(shí)驗(yàn)原理(10分):要求以自己的語(yǔ)言歸納要點(diǎn);

 、趯(shí)驗(yàn)材料(5分):包括樣品、試劑及儀器。只列出主要儀器、試劑(常規(guī)材料不列);

  ③實(shí)驗(yàn)方法(15分):包括流程或路線、操作步驟,要以流程圖、表格式給出要點(diǎn),簡(jiǎn)明扼要。依據(jù)各部分內(nèi)容是否完整、清楚、簡(jiǎn)明等,分以下三個(gè)等級(jí)給分。

  優(yōu)秀:項(xiàng)目完整,能反映實(shí)驗(yàn)者的加工、整理、提煉。

  合格:較完整,有一定整理,但不夠精煉。

  不合格:不完整、缺項(xiàng),大段文字,完全照抄教材,記流水賬。

  實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)報(bào)告不合格者,不允許進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)應(yīng)重新預(yù)約,待實(shí)驗(yàn)室安排時(shí)間后方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

  2.實(shí)驗(yàn)記錄內(nèi)容(20分)

  實(shí)驗(yàn)記錄是實(shí)驗(yàn)教學(xué)、科學(xué)研究的重要環(huán)節(jié)之一,必須培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)。

  實(shí)驗(yàn)記錄的主要內(nèi)容包括以下三方面:

 、僦饕獙(shí)驗(yàn)條件(如材料的來源、質(zhì)量;試劑的規(guī)格、用量、濃度;實(shí)驗(yàn)時(shí)間、操作要點(diǎn)中的技巧、失誤等,以便總結(jié)實(shí)驗(yàn)時(shí)進(jìn)行核對(duì)和作為查找成敗原因的參考依據(jù));

 、趯(shí)驗(yàn)中觀察到的現(xiàn)象(如加入試劑后溶液顏色的變化);

 、墼紝(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù):設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表格(注意三線表格式),準(zhǔn)確記錄實(shí)驗(yàn)中測(cè)得的原始數(shù)據(jù)。記錄測(cè)量值時(shí),要根據(jù)儀器的精確度準(zhǔn)確記錄有效數(shù)字(如吸光值為0.050,不應(yīng)寫成0.05),注意有效數(shù)字的位數(shù)。

  實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)在實(shí)驗(yàn)過程中書寫;應(yīng)該用鋼筆或者圓珠筆記錄,不能用鉛筆。記錄不可擦抹和涂改,寫錯(cuò)時(shí)可以準(zhǔn)確劃去重記。記錄數(shù)據(jù)時(shí)請(qǐng)教師審核并簽名。

  實(shí)驗(yàn)記錄分以下三個(gè)等級(jí)給分。

  優(yōu)秀:如實(shí)詳細(xì)地記錄了實(shí)驗(yàn)條件、實(shí)驗(yàn)中觀察到的現(xiàn)象、結(jié)果及實(shí)驗(yàn)中的原始數(shù)據(jù)(如三次測(cè)定的吸光度值)等;實(shí)驗(yàn)記錄用鋼筆或者圓珠筆記錄,沒有抹擦和涂改跡象。書寫準(zhǔn)確,表格規(guī)范(三線表)。有教師的簽字審核。

  合格:記錄了主要實(shí)驗(yàn)條件,但不詳細(xì)、凌亂;實(shí)驗(yàn)中觀察到的現(xiàn)象不細(xì)致;原始數(shù)據(jù)無涂改跡象,但不規(guī)范。有教師的簽字審核。

  不合格:記錄不完整,有遺漏;原始數(shù)據(jù)有抹擦和涂改跡象、捏造數(shù)據(jù)(以0分計(jì));圖、表格形式錯(cuò)誤;用鉛筆記錄原始數(shù)據(jù);無教師的簽字審核。 若記錄的結(jié)果有懷疑、遺漏、丟失,必須重做實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)。

  3.結(jié)果與討論(45分)

 。1)數(shù)據(jù)處理(5分)

  對(duì)實(shí)驗(yàn)中所測(cè)得的一系列數(shù)值,要選擇合適的處理方法進(jìn)行整理和分析。數(shù)據(jù)處理時(shí),要根據(jù)計(jì)算公式正確書寫中間計(jì)算過程或推導(dǎo)過程及結(jié)果,得出最終實(shí)驗(yàn)結(jié)果。要注意有效數(shù)字的位數(shù)、單位(國(guó)際單位制)。經(jīng)過統(tǒng)計(jì)處理的數(shù)據(jù)要以X〒SD表示?煞殖梢韵氯齻(gè)等級(jí)給分。

  優(yōu)秀:處理方法合理,中間過程清楚,數(shù)據(jù)格式單位規(guī)范。

  合格:處理方法較合理,有中間計(jì)算過程;數(shù)據(jù)格式單位較規(guī)范。

  不合格:處理方法不當(dāng);無中間過程;有效數(shù)字的位數(shù)、單位不規(guī)范。

 。2)結(jié)果(20分)

  實(shí)驗(yàn)結(jié)果部分應(yīng)把所觀察到的現(xiàn)象和處理的最終數(shù)據(jù)進(jìn)行歸納、分析、比對(duì),以列表法或作圖法來表示。同時(shí)對(duì)結(jié)果還可附以必要的說明。

  要注意圖表的規(guī)范:表格要有編號(hào)、標(biāo)題;表格中數(shù)據(jù)要有單位(通常列在每一列頂端的第一行或每一行左端的第一列)。圖也要有編號(hào)、標(biāo)題,標(biāo)注在圖的下方;直角坐標(biāo)圖的縱軸和橫軸要標(biāo)出方向、名稱、單位和長(zhǎng)度單位;電泳圖譜和層析圖譜等要標(biāo)明正、負(fù)極方向及分離出的區(qū)帶、色帶或色斑的組分或成分。電泳結(jié)果還要標(biāo)記泳道,并在圖題下給出泳道的注釋;要標(biāo)出分子量標(biāo)準(zhǔn)的各條帶的大小。并且注意需要結(jié)合圖表對(duì)結(jié)果進(jìn)行較詳細(xì)的解釋說明。

  可分成以下三個(gè)等級(jí)給分。

  優(yōu)秀:實(shí)驗(yàn)結(jié)果有歸納、 解釋說明,結(jié)果準(zhǔn)確,格式規(guī)范。

  合格:堆砌實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象、數(shù)據(jù),解釋說明少。

  不合格:最終實(shí)驗(yàn)結(jié)果錯(cuò)誤且無解釋說明,圖表、數(shù)字不規(guī)范。

 。3)討論(20分)

  討論應(yīng)圍繞實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行,不是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重述,而是以實(shí)驗(yàn)結(jié)果為基礎(chǔ)的邏輯推論,基本內(nèi)容包括:①用已有的專業(yè)知識(shí)理論對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行討論,從理論上對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的各種資料、數(shù)據(jù)、現(xiàn)象等進(jìn)行綜合分析、解釋,說明實(shí)驗(yàn)結(jié)果,重點(diǎn)闡述實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的一般規(guī)律與特殊性規(guī)律之間的關(guān)系。

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