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生物化妝品檢測(cè)
篇一：化妝品微生物檢測(cè)
不同品牌的化妝品中微生物污染狀況檢測(cè)
[目的要求]
1、學(xué)會(huì)化妝品中菌落總數(shù)及霉菌、酵母總數(shù)的檢測(cè)方法及檢測(cè)原理；
2、檢測(cè)市場(chǎng)上一些化妝品的微生物是否超標(biāo)；
[實(shí)驗(yàn)原理]
任何一種化妝品或藥物，在生產(chǎn)、保存、運(yùn)輸和使用過(guò)程中，由于各種不同的原因，其產(chǎn)品質(zhì)量可能發(fā)生質(zhì)變。這些原因其一就是由所謂微生物所造成的，微生物是一群形體極微小的生物，它一般包括細(xì)菌、酵母菌、霉菌和病毒等�；瘖y品或藥物受到微生物的污染，可引起產(chǎn)品物理性狀（如色澤、氣味等）變化，改變產(chǎn)品有效成份，有的還會(huì)引起致敏、毒素和病毒感染，因此必須嚴(yán)格控制化妝品或藥物中的微生物。菌落總數(shù)是指檢樣經(jīng)過(guò)處理，在一定條件下培養(yǎng)后(如培養(yǎng)基成分，培養(yǎng)溫度，培養(yǎng)時(shí)間，pH值，需氧性質(zhì)等)，1g(1mL)檢樣中所含菌落的總數(shù)。所得結(jié)果只包括一群本方法規(guī)定的條件下生長(zhǎng)的嗜中溫的需氧性菌落總數(shù)。
霉菌和酵母菌總數(shù)是指檢樣在一定條件下培養(yǎng)后，1g或1mL化妝品中所污染的活的霉菌和酵母菌菌落總數(shù)，藉以判(轉(zhuǎn)載于:l裝無(wú)菌生理鹽水；9ml裝無(wú)菌生理鹽水；9cm滅菌平板，錐形瓶，玻璃涂棒，移液槍；Tip頭；培養(yǎng)箱；水浴鍋；無(wú)菌棉簽；超凈工作臺(tái)；高壓蒸汽滅菌鍋等。
[實(shí)驗(yàn)步驟]
一、化妝品的微生物學(xué)污染狀況檢測(cè)
1、樣品采集
按無(wú)菌方法隨機(jī)抽取各種品牌牙膏、成人護(hù)扶品（膏、霜、洗面奶、爽膚水、粉餅等）、嬰幼兒用護(hù)扶品（爽身粉、面霜等）。
2、樣品預(yù)處理
在化妝品中通常都加入了防腐劑，使化妝品能較長(zhǎng)時(shí)間使用而不腐敗變質(zhì)，因此在進(jìn)行化妝品衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)時(shí)，必須消除化妝品中的防腐劑，使長(zhǎng)期處于瀕死狀態(tài)或半損傷狀態(tài)的細(xì)菌被檢出，從而得出正確的檢驗(yàn)結(jié)果。
消除防腐劑抑菌作用的方法，常用的方法有：
�。�1）稀釋法：用稀釋液和培養(yǎng)基將樣品稀釋到一定濃度，使其抑菌成分的濃度減少到無(wú)抑菌作用的程度，再進(jìn)行檢驗(yàn)。
�。�2）中和法：在供試液或培養(yǎng)基中加入中和劑，以中和防腐劑的抑菌效果。防腐劑種類不同所用的中和劑亦不同。本實(shí)驗(yàn)采用吐溫80+卵磷脂來(lái)做中和劑。
3、樣品的制備
�。�1）液體樣品
1水溶性的液體樣品，量取10mL加到90mL滅菌生理鹽水中，混勻后，制成1：10檢液○
2油性液體樣品，取樣品10mL，先加5mL滅菌液體石蠟混勻，再加10mL滅菌的吐溫80，在40℃～○
44℃水浴中振蕩混合10min，加入滅菌的生理鹽水75mL(在40℃～44℃水浴中預(yù)溫)，在40℃～44℃水浴中乳化，制成1：10的懸液。
�。�2）膏，霜，乳劑半固體狀樣品
1親水性的樣品，稱取10g，加到裝有玻璃珠及90mL滅菌生理鹽水的三角瓶中，充分振蕩混勻，靜置○
15min。.取其上清液作為1：10的檢液。
2疏水性樣品，稱取10g，放到滅菌的研缽中，加10mL滅菌液體石蠟,研磨成粘稠狀，再加入10mL滅○
菌吐溫80，研磨待溶解后，加70mL滅菌生理鹽水，在40℃～44℃水浴中充分混合，制成1：10檢液。
�。�3）固體樣品，稱取10g，加到90mL滅菌生理鹽水中，充分振蕩混勻，使其分散混懸，靜置后，取上清液作為1：10的檢液。
如有均質(zhì)器，上述水溶性膏，霜，粉劑等，可稱10g樣品加入90mL滅菌生理鹽水，均質(zhì)1min～2min；疏水性膏，霜及眉筆，口紅等，稱10g樣品，加10mL滅菌液體石蠟，10mL滅菌吐溫80，70mL滅菌生理鹽水，均質(zhì)3min～5min。
4、菌落總數(shù)檢驗(yàn)
（1）用滅菌吸管吸取1：10稀釋的檢液2mL，分別注入到兩個(gè)滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL。另取1mL注入到9mL滅菌生理鹽水試管中(注意勿使吸管接觸液面)，更換一支吸管，并充分混勻，制成1：100檢液，各吸取1mL，分別注入到兩個(gè)滅菌平皿內(nèi)。如樣品含菌量高，還可再稀釋成1：1000，1：10000，……等，每種稀釋度應(yīng)換1支吸管。
（2）將融化并冷至45℃～50℃的卵磷脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾注到平皿內(nèi)，每皿約15mL，隨即轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使樣品與培養(yǎng)基充分混合均勻，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h。另取一個(gè)不加樣品的滅菌空平皿，加入約15mL卵磷脂吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h，為空白對(duì)照。
5、霉菌和酵母菌數(shù)的檢測(cè)
取1：10的檢液各1mL分別注入2個(gè)滅菌平皿內(nèi),(若菌量較多時(shí)可順序再做10倍稀釋)，另取1個(gè)滅菌空平皿(作空白對(duì)照)，每皿分別注入融化并冷至45℃左右的虎紅培養(yǎng)基約15mL，充分搖勻。凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置28℃培養(yǎng)箱，培養(yǎng)3天，計(jì)數(shù)平板內(nèi)生長(zhǎng)的霉菌和酵母菌數(shù)。若有霉菌蔓延生長(zhǎng)，為避免影響其它霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)時(shí)，于48h應(yīng)及時(shí)將此平板取出計(jì)數(shù)。
6、菌落計(jì)數(shù)方法
�。�1）菌落總數(shù)技術(shù)
先用肉眼觀察，點(diǎn)數(shù)菌落數(shù)，然后再用放大5～10倍的放大鏡檢查，以防遺漏。記下各平皿的菌落數(shù)后，求出同一稀釋度各平皿生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)。若平皿中有連成片狀的菌落或花點(diǎn)樣菌落蔓延生長(zhǎng)時(shí)，該
平皿不宜計(jì)數(shù).若片狀菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落數(shù)分布又很均勻，則可將此半個(gè)平皿菌落計(jì)數(shù)后乘以2，以代表全皿菌落數(shù)。
�。�2）霉菌和酵母菌菌落計(jì)數(shù)
先點(diǎn)數(shù)每個(gè)平板上生長(zhǎng)的霉菌和酵母菌菌落數(shù)，求出每個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)。判定結(jié)果時(shí)，應(yīng)選取菌落數(shù)在20～100個(gè)范圍之內(nèi)的平皿計(jì)數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)后，即為每g(或每mL)檢樣中所含的霉菌和酵母菌數(shù)。其它范圍內(nèi)的菌落數(shù)報(bào)告應(yīng)參照菌落總數(shù)的報(bào)告方法報(bào)告之。
每g(或每mL)化妝品含霉菌和酵母菌數(shù)以CFU/g(mL)表示。
7、評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)
化妝品的微生物學(xué)質(zhì)量應(yīng)符合下述規(guī)定：
�。�1）眼部、口唇、口腔粘膜用化妝品以及嬰兒和兒童用化妝品細(xì)菌總數(shù)不得大于500/ml或500/g。
�。�2）其它化妝品細(xì)菌總數(shù)不得大于1000/ml或1000/g。
[注意事項(xiàng)]
�。�1）所采集的樣品，應(yīng)具有代表性，一般視每批化妝品數(shù)量大小，隨機(jī)抽取相應(yīng)數(shù)量的包裝單位。檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別從兩個(gè)包裝單位以上的樣品中共取10g或10ml。包裝量小的樣品，取樣量可酌減。
�。�2）供檢樣品，應(yīng)嚴(yán)格保持原有的包裝狀態(tài)。容器不應(yīng)有破裂，在檢驗(yàn)前不得啟開(kāi)，以防再污染。
�。�3）制成供試液后，應(yīng)盡快稀釋，注皿。一般稀釋后應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)操作完畢。
�。�4）注意抑菌現(xiàn)象。由于防腐劑未被中和，往往使平板計(jì)數(shù)結(jié)果受影響，如低稀釋時(shí)菌落少。而高釋釋度時(shí)菌落數(shù)反而增大。
�。�5）在檢驗(yàn)過(guò)程中，從開(kāi)封到全部檢驗(yàn)操作結(jié)束，均須防止微生物的再污染和擴(kuò)散，所用器皿及材料均應(yīng)事先滅菌，全部操作應(yīng)在無(wú)菌室內(nèi)進(jìn)行�；蛟谙鄳�(yīng)條件下，按無(wú)菌操作規(guī)定進(jìn)行。
二、口服藥物的微生物學(xué)污染狀況檢測(cè)
1、樣品采集
按無(wú)菌方法隨機(jī)抽取各種品牌牙膏、成人護(hù)扶品（膏、霜、洗面奶、爽膚水、粉餅等）、嬰幼兒用護(hù)扶品（爽身粉、面霜等）。
2、樣品的制備
按無(wú)菌方法取藥粒10g或10ml投入到裝有90ml的無(wú)菌生理鹽水中，搖動(dòng)至完全溶解，即為1：10樣品液，按前述方法相應(yīng)可制備1：100、1：1000的稀釋液。
2、菌落總數(shù)檢驗(yàn)
將融化并冷至45℃～50℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾注到平皿內(nèi)，每皿約15mL，隨即轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使樣品與培養(yǎng)基充分混合均勻，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h。另取一個(gè)不加樣品的滅菌空平皿，加入約15m營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h，為空白對(duì)照。
4、霉菌和酵母菌數(shù)的檢測(cè)
取1：10的檢液各1mL分別注入2個(gè)滅菌平皿內(nèi),(若菌量較多時(shí)可順序再做10倍稀釋)，另取1個(gè)滅菌
空平皿(作空白對(duì)照)，每皿分別注入融化并冷至45℃左右的虎紅培養(yǎng)基約15mL，充分搖勻。凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置28℃培養(yǎng)箱，培養(yǎng)3天，計(jì)數(shù)平板內(nèi)生長(zhǎng)的霉菌和酵母菌數(shù)。若有霉菌蔓延生長(zhǎng)，為避免影響其它霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)時(shí)，于48h應(yīng)及時(shí)將此平板取出計(jì)數(shù)。
5、評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)
口服生化藥品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌總數(shù)＜1000cfu/g，霉菌數(shù)＜100cfu/g
[實(shí)驗(yàn)報(bào)告]
1、分別將實(shí)驗(yàn)測(cè)出的樣品數(shù)據(jù)以表格方式報(bào)告結(jié)果。（水、食品各1個(gè)表格）
2、對(duì)樣品菌落總數(shù)作出是否符合衛(wèi)生要求的結(jié)論。
[思考題]
從你所檢測(cè)的化妝品和藥物的各指標(biāo)的結(jié)果來(lái)看，是否符合國(guó)家的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)？如果有超標(biāo)情況，你認(rèn)為主要由哪些因素造成？
篇二：生物化妝品
生物化妝品
概述
生物化妝品是指把現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用到化妝品中，利用基因重組技術(shù)，體外獲得具有生物效應(yīng)的生物活性因子。和原始化妝品相比，它更強(qiáng)調(diào)功能性、安全性、親和性，從根本上調(diào)理和改善皮膚健康狀態(tài)。
發(fā)展歷程生物技術(shù)這門學(xué)科在20世紀(jì)70年代興起，在21世紀(jì)蓬勃發(fā)展，自從DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)后，生物可以說(shuō)給人來(lái)掀起了一場(chǎng)革命，經(jīng)過(guò)幾十年的技術(shù)積累，生物技術(shù)已經(jīng)廣泛滲透于能源、醫(yī)療、農(nóng)業(yè)和環(huán)境等相關(guān)學(xué)科領(lǐng)域中，并逐步的實(shí)施到人們的日常生活。同樣，在21世紀(jì)的今天現(xiàn)代生物技術(shù)的飛速發(fā)展和廣泛應(yīng)用也給化妝品行業(yè)帶來(lái)了全新的發(fā)展機(jī)遇。
化妝品經(jīng)歷了一個(gè)漫長(zhǎng)的過(guò)程，從油脂類這種單純的物理防護(hù)到油水混合乳化護(hù)膚，而添加木瓜、人參、蘆薈等這些天然植物的提取物是一大跨越，不過(guò)新的時(shí)代已經(jīng)來(lái)臨，從上世紀(jì)末，美、法等國(guó)家已經(jīng)開(kāi)始把生物技術(shù)應(yīng)用化妝品中，生物美容時(shí)代算是革命性的進(jìn)展，其本質(zhì)區(qū)別是作用目標(biāo)更加明確，利用生物活性因子在分子水平上對(duì)受損細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)和調(diào)整，改善其組織和代謝，促進(jìn)皮膚細(xì)胞生長(zhǎng)，調(diào)節(jié)皮膚平衡，從根本上達(dá)到保健皮膚、保持青春的目的。
什么是生物活性因子
生物活性因子主要通過(guò)基因表達(dá)技術(shù)，歷經(jīng)發(fā)酵、純化等復(fù)雜工藝，嚴(yán)格控制各種雜志含量。天津強(qiáng)微特生物科技有限公司生產(chǎn)的生物蛋白因子，各項(xiàng)指標(biāo)達(dá)到或超過(guò)中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)高效液相色譜（HPLC）檢測(cè)，純度超過(guò)95%。以下是在護(hù)膚品中使用較多的三種蛋白因子：
人表皮生長(zhǎng)因子（hEGF）/人寡肽1（Humanoligopeptide-1）：
對(duì)受損皮膚、創(chuàng)傷皮膚和改建性皮膚具有良好的修復(fù)、護(hù)理作用。特別適用于美容手術(shù)后皮膚的護(hù)理和恢復(fù)，有縮短創(chuàng)傷愈合時(shí)間和減少疤痕形成的作用。
促進(jìn)皮膚各類細(xì)胞的新陳代謝，增強(qiáng)皮膚細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，減緩皮膚的衰老，改善皮膚的光澤。
促進(jìn)蛋白合成，調(diào)節(jié)皮膚膠原蛋白的降解和更新，增強(qiáng)皮膚彈性，減少皮膚皺紋的形成，撫平皮膚已有的細(xì)紋。
防止和護(hù)理痤瘡。
堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）/人寡肽3（Humanoligopeptide-3）：
改善細(xì)胞生長(zhǎng)的微環(huán)境，促進(jìn)彈性纖維和膠原蛋白的合成，使肌膚富有
彈性，是皮膚處于滑潤(rùn)狀態(tài)。
促進(jìn)成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育，增強(qiáng)細(xì)胞的新陳代謝，減少皮膚皺紋的生成。降低皮膚細(xì)胞中黑色素和有色細(xì)胞的含量，減輕皮膚色素的沉積。
角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子（KGF）/INCI名稱：人寡肽5（Humanoligopeptide-5）：促進(jìn)上皮細(xì)胞的增殖和分化，促進(jìn)傷口愈合。
促進(jìn)毛發(fā)再生。
促進(jìn)膠原蛋白的合成，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的形成，增強(qiáng)皮膚的彈性和飽滿度，減少和消除皺紋。
進(jìn)入生物美容時(shí)代的國(guó)外品牌1966年，LaMer海藍(lán)之謎面霜由于在配方中率先采用了用生物發(fā)酵技術(shù)處理海藻等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)而獲得的MiracleBroth，歷經(jīng)50年，其神奇面霜依然受人們歡迎；
1997年，護(hù)膚品Revive（利維膚）品牌在美國(guó)始建，其創(chuàng)始人布朗博士由于在多種產(chǎn)品配方中采用生物活性蛋白EGF（人表皮生長(zhǎng)因子）作為功能性原料，促使其產(chǎn)品抗衰老效果極其顯著，短短十年已位居美國(guó)頂級(jí)奢侈品之列，其明星產(chǎn)品PeauMagnifiqueYouthRecruit受到上層人士的青睞。
國(guó)內(nèi)目前還比較少，天津強(qiáng)微特生物科技公司算是一家，它由于是生物高科技起家，其旗下護(hù)膚品牌-芭睿芭睿品牌處處都活躍著生物元素，時(shí)空煥顏EGF禮盒依據(jù)專利技術(shù)，自主研發(fā)生產(chǎn)EGF，經(jīng)真空凍干封存而成，長(zhǎng)效保持活性，達(dá)到并超過(guò)進(jìn)口化妝品有效物的含量和活性。
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